过表达大鼠TIPE2基因重组腺病毒载体的构建
张有斌1
余云生1
沈振亚1
周东明2
1.苏州大学附属第一医院心脏大血管外科,江苏省苏州市,2150062.中国科学院上海巴斯德研究所,上海市,200025
摘要：背景：TIPE2抗炎蛋白，通过对T细胞受体(TCR)和T细胞TOLL样受体信号途径实行负向调节，从而对适应性免疫和固有免疫起到负性调控作用，有效地维持机体内环境的稳定。<br> 目的：使用人工合成腺病毒载体构建能过表达大鼠TIPE2基因的重组腺病毒。<br> 方法：利用RT-PCR的方法，从大鼠淋巴细胞中扩增出大鼠TIPE2基因，克隆到穿梭质粒pShuttle-clontech的表达框中，然后将包含TIPE2的完整表达框，进一步亚克隆到黑猩猩来源的腺病毒包装载体AdC68，转染HEK 293A细胞，包装出重组腺病毒。并以其感染HEK293A细胞，采用western blotting方法检测TIPE2基因的表达水平。<br> 结果与结论：PCR扩增、酶切鉴定和测序结果表明，所获取的cDNA为TIPE2的蛋白编码基因，western blotting结果表明，重组腺病毒能可高效表达TIPE2基因。说明成功完成AdC68-TIPE2重组腺病毒的构建，该腺病毒载体，能稳定表达大鼠TIPE2基因。
关键词：组织构建组织工程器官移植重组腺病毒Adc68TIPE2基因基因表达转染T细胞
分类号：R394.2(医学遗传学)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1743-1748 )
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