环氧化酶2基因沉默不影响人骨髓间充质干细胞定向分化的能力
赫天1
张海宁1
项金瑜2
刘相萍3
邓继红4
王英振1
1.青岛大学医学院附属医院,山东省创伤骨科研究所,关节外科,山东省青岛市2660032.青岛大学附属烟台毓璜顶医院肿瘤科,山东省烟台市,2640003.青岛大学医学院附属医院中心实验室,山东省青岛市,2660034.双鸭山市人民医院检验科,黑龙江省双鸭山市55100
摘要：背景:目前环氧化酶2基因沉默在干细胞中的研究还处在初级阶段.目的:构建携带环氧化酶2基因沉默的慢病毒载体,观察其在人骨髓间充质干细胞中的表达,以及其定向分化潜能变化情况.方法:应用重组慢病毒技术构建携带沉默环氧化酶2基因和绿色荧光蛋白的慢病毒载体,并用其转染体外培养第3代的人骨髓间充质干细胞,以无目的基因的慢病毒转染人骨髓间充质干细胞的实验组和未做处理的人骨髓间充质干细胞分别作为阴性对照组和空白组进行对比.转染后7d分别提取各组细胞的总RNA和蛋白检测环氧化酶2表达量.对环氧化酶2基因沉默的人骨髓间充质干细胞和正常人骨髓间充质干细胞定向诱导,观察环氧化酶2基因沉默对人骨髓间充质干细胞成脂、成骨、成软骨能力的影响.结果与结论:慢病毒转染3d后,荧光显微镜下可见人骨髓间充质干细胞发出绿色荧光,阴性对照组转染效率可达90％以上,实验组转染效率达85％以上.RT-PCR和Western blot检测结果显示,环氧化酶2基因在人骨髓间充质干细胞中的基因水平和蛋白水平均得到了明显抑制.环氧化酶2基因转染对人骨髓间充质干细胞成脂、成骨、成软骨能力无明显影响.
关键词：干细胞骨髓干细胞人骨髓间充质干细胞重组慢病毒环氧化酶2基因基因沉默成脂分化成骨分化成软骨分化国家自然科学基金
分类号：R394.2(医学遗传学)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 2140-2146 )
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