成人脂肪间充质干细胞的定向成骨诱导
郭艳萍1
陶常波2
张爱君2
李雪阳2
沈才齐2
李政道3
金培生2
1.徐州医学院研究生院,江苏省徐州市 221000; 徐州医学院附属医院整形外科,江苏省徐州市 2210002.徐州医学院附属医院整形外科,江苏省徐州市,2210003.政道干细胞实验室,江苏省徐州市,221000
摘要:背景:脂肪分离可获得大量的间充质干细胞并成功向骨、软骨、脂肪、心肌等多个方向诱导分化。<br> 目的:建立成人脂肪间充质干细胞体外分离培养、成骨分化方法,并探讨脂肪间充质干细胞作为骨组织工程的种子细胞的前景。<br> 方法:通过胶原酶消化法从成人脂肪中分离间充质干细胞,进行体外培养,流式细胞仪检测细胞表面标记物, CCK8检测细胞活性,成骨诱导液诱导干细胞向骨细胞分化,BCIP/NBT比色法染色检测碱性磷酸酶,茜素红染色检测钙结节形成,RT-PCR检测碱性磷酸酶,骨桥蛋白表达变化。<br> 结果与结论:利用脂肪抽吸液成功培养出脂肪间充质干细胞,且能稳定传代,增殖能力旺盛;流式细胞仪检测证实有特定的间充质干细胞表面标记物表达;成骨诱导脂肪间充质干细胞后呈典型的成骨细胞形态;碱性磷酸酶染色阳性,茜素红染色后可见钙结节形成,成骨诱导培养0,3,7,14,21,28 d,RT-PCR定量检测结果证实碱性磷酸酶、骨桥蛋白阳性表达。说明用酶消化法可以从人脂肪中分离得到脂肪间充质干细胞;脂肪间充质干细胞可向骨细胞诱导分化,阳性表达骨桥蛋白,碱性磷酸酶,是一种优良的骨组织工程的种子细胞。
关键词:干细胞脂肪干细胞培养诱导脂肪间充质干细胞成骨分化组织工程骨颅骨缺损碱性磷酸酶骨桥蛋白
分类号:R394.2(医学遗传学)
资助基金:江苏省科教兴卫重点人才资助项目(RC2011115)
论文发表日期:2014-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 2987-2992 )
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