钠钙交换体启动子促进诱导多能干细胞向心肌细胞转化
戴波1
李洪涛1
刘泽1
肖定璋2
余细勇2
陈斌1
何建新1
向定成1
邱健1
Wang Yi-gang3
1.解放军广州军区广州总医院,广东省广州市,5100102.广东省医学科学院,广东省人民医院,广东省血管病研究所,广东省广州市 5100803.Department of Pathology and Laboratory Medicine,University of Cincinnati Medical Center,Cincinnati,Ohio 45267,USA
摘要:背景:诱导多能干细胞治疗缺血性心脏病被认为是极具前景的方法,但目前仍未找到一种理想的诱导方式。目的:探讨钠钙交换体(NCX1)启动子诱导多能干细胞体外分化为心肌细胞的作用。<br>  方法:构建含钠钙交换体1启动子的pLVX-IRES-ZsGreen1慢病毒质粒,使用ViraPowerTM慢病毒包装系统共转染293FT细胞。收集病毒测定病毒滴度后感染小鼠诱导多能干细胞,并使用嘌呤霉素进行筛选。观察胚状体数量以及诱导多能干细胞的分化效率,使用RT-PCR、免疫荧光分析法检测心肌特异标记物。<br>  结果与结论:成功构建了含钠钙交换体1启动子的pLVX-IRES-ZsGreen1慢病毒,感染小鼠诱导多能干细胞后使用流式细胞仪分选NCX1+/GFP+细胞。与NCX1-/GFP-细胞相比,NCX1+/GFP+细胞在4 d即出现细胞分化和跳动,NCX1+细胞GATA4/MEF2c/Nkx2.5基因表达分别是NCX1-细胞的4.2,7.5,2.5倍,免疫荧光显示CX43和心肌肌钙蛋白I呈阳性表达。结果表明,钠钙交换体1启动子可以促进小鼠诱导多能干细胞向心肌细胞分化。
关键词:干细胞诱导小鼠诱导多能干细胞钠钙交换体启动子慢病毒国家自然科学基金
分类号:R394.2(医学遗传学)
资助基金:国家自然科学基金(81270189)广东省自然科学基金(S2011040000852)
论文发表日期:2014-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 3069-3074 )
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中国组织工程研究

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北大核心CSTPCD
ISSN:2095-4344
年,卷(期):2014,(19)
所属栏目:技术与方法 -- 干细胞培养与分化