骨形态发生蛋白2诱导慢性腱病大鼠肌腱干细胞体外成骨、成软骨分化
林禹丞1
王宸1
芮云峰1
成心锟2
马良彧2
1.东南大学附属中大医院骨科,江苏省南京市,2100092.东南大学医学院,江苏省南京市,210009
摘要：背景：目前临床对于慢性腱病缺乏有效的治疗手段，原因在于其发病机制至今尚未阐明。<br> 目的：研究体外骨形态发生蛋白2对胶原酶诱导的大鼠慢性腱病模型髌腱来源肌腱干细胞的成骨、成软骨分化的作用。<br> 方法：从大鼠慢性腱病模型的髌腱中分离培养出原代肌腱干细胞，传代培养至第3代细胞，行成骨、成脂、成软骨诱导分化鉴定其干细胞的特性。将肌腱干细胞(P3)单层培养至细胞融合，用重组人骨形态发生蛋白2干预。7 d后分别行茜素红染色，并行茜素红染色定量分析。将肌腱干细胞体外三维微球培养后分为2组，诱导组用重组人骨形态发生蛋白2干预，对照组不进行干预。21 d后三维微球行苏木精-伊红染色，阿利辛蓝染色以及Sox9和Ⅱ型胶原免疫组织化学染色。<br> 结果与结论：慢性腱病大鼠来源原代肌腱干细胞体外培养呈克隆样集落生长，传代后细胞主要表现为多突的纺锤形和星形的扁平细胞，具有成纤维细胞样的特征。肌腱干细胞(P3)成脂诱导10 d，油红O染色阳性；成骨诱导7 d，茜素红染色阳性；成软骨诱导14 d，苏木精-伊红染色阳性可见软骨样细胞，Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性。单层培养的肌腱干细胞用重组人骨形态发生蛋白2诱导7 d茜素红染色阳性，对照组为阴性，茜素红染色定量检测显示差异有显著性意义。重组人骨形态发生蛋白2诱导肌腱干细胞21 d，苏木精-伊红染色可见软骨样细胞形成、阿利辛蓝染色可见细胞内糖胺多糖沉积、Sox9和Ⅱ型胶原免疫组织化学染色均呈阳性。可见体外重组人骨形态发生蛋白2可以诱导慢性腱病来源的肌腱干细胞成骨、成软骨分化。这为进一步研究慢性腱病的发病机制提供了细胞生物学依据。
关键词：干细胞诱导慢性腱病肌腱干细胞成骨分化成软骨分化骨形态发生蛋白2国家自然科学基金
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：国家自然科学基金(81201422)江苏省自然科学基金青年项目(BK2012334)东南大学基本科研业务费创新基金(3290002401)国家级大学生创新创业训练计划项目(1210286090)江苏省博士后科学基金特别资助项目(2012M520983)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 3075-3081 )
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