LMP-1基因转染骨髓间充质干细胞的LIM矿化蛋白表达
金夏生1
王子江1
向川2
1.山西医科大学第二医院 骨科,山西省太原市,0300012.山西医科大学第二医院 骨关节科,山西省太原市,030001
摘要:背景:体外实验提示LMP-1基因可提高骨质疏松性骨髓间充质干细胞LMP-1蛋白的表达。目的:用含有LIM矿化蛋白1基因的反转录病毒载体(RV-LMP-1-GFP)转染骨质疏松性SD大鼠骨髓间充质干细胞,检测其对骨质疏松性骨髓间充质干细胞LIM矿化蛋白表达的影响。方法:随机取雌性SD大鼠12只,采用双侧卵巢切除法建立骨质疏松性大鼠模型,另取6只大鼠仅切除卵巢周围等量脂肪组织,保留卵巢为假手术组。喂养2个月后取双侧股骨、胫骨、肱骨分离培养其骨髓间充质干细胞。均取3代培养细胞随机分为去势组、LMP-1转染组(转染LMP-1基因)和假手术组。分别行RT-PCR及Western-Blot检测各组细胞LIM矿化蛋白1 mRNA和蛋白的表达。结果与结论:培养出骨质疏松性SD大鼠骨髓间充质干细胞,转染后倒置荧光显微镜下可见绿色荧光表达;3组细胞均可在基因及蛋白水平表达 LIM 矿化蛋白1。与假手术组及去势组比较,LMP-1基因转染组的LIM-1mRNA和蛋白的表达均升高显著(P<0.05),假手术组与去势组之间差异无显著性意义(P>0.05)。成功实现重组 RV-LMP-1-GFP 基因在骨质疏松性 SD 大鼠骨髓间充质干细胞中 mRNA 和蛋白水平的表达,且LMP-1的表达水平显著提高。结果表明重组LMP-1基因成功导入骨质疏松性大鼠骨髓间充质干细胞基因组中,并使得LMP-1 mRNA和蛋白的表达明显提高。
关键词:干细胞骨髓干细胞骨髓间充质干细胞去势大鼠LIM矿化蛋白1基因反转录病毒转染骨质疏松
分类号:R394.2(医学遗传学)
论文发表日期:2014-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 3633-3638 )
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中国组织工程研究

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北大核心CSTPCD
ISSN:2095-4344
年,卷(期):2014,(23)
所属栏目:研究与报告 -- 骨髓干细胞