携带低氧诱导因子1α慢病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞后成骨基因的表达
付志杰1
张巨峰2
王大平2
陈洁琳2
段莉2
何美建1
李庆庆1
李文翠1
熊建义2
1.汕头大学医学院深圳二院临床学院,广东省深圳市 518035; 深圳市第二人民医院骨科,广东省深圳市 5180352.汕头大学医学院深圳二院临床学院,广东省深圳市 518035; 深圳市第二人民医院骨科,广东省深圳市 518035; 深圳市组织工程重点实验室,广东省深圳市 518035
摘要:背景:人低氧诱导因子1α可调控其下游成骨及成血管基因的表达,具有提高成骨活性的作用。目的:观察携带人低氧诱导因子1α慢病毒感染的大鼠骨髓间充质干细胞中成骨基因表达情况。方法:通过RT-PCR方法从Hela细胞中获得低氧诱导因子1α,构建携带低氧诱导因子1α的慢病毒表达质粒Lenti-HIF-1α-eGFP,与LentiPac HIV混合包装质粒共包装293Ta细胞,获得病毒;采用全骨髓直接贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,使用流式细胞仪对骨髓间充质干细胞进行鉴定。分别在慢病毒感染骨髓间充质干细胞1,4,7,14 d后,用实时荧光定量PCR检测骨髓间充质干细胞中成骨基因骨形态发生蛋白2、骨钙蛋白、骨桥蛋白、碱性磷酸酶的表达水平。结果与结论:Lenti-HIF-1α-eGFP有效地感染骨髓间充质干细胞,实时荧光定量PCR检测结果显示成骨基因骨形态发生蛋白2、骨钙蛋白、骨桥蛋白、碱性磷酸酶在Lenti-HIF-1α-eGFP感染后第4天开始明显过表达,且持续至14 d。结果表明低氧诱导因子1α可以提高骨髓间充质干细胞的成骨活性。
关键词:干细胞骨髓干细胞低氧诱导因子1α骨髓间充质干细胞基因转染骨缺损慢病毒载体骨组织工程成骨基因成骨活性广东省自然科学基金
分类号:R394.2(医学遗传学)
论文发表日期:2014-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:8( 4455-4462 )
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