慢病毒高效感染皮肤人永生化表皮细胞株HaCaT细胞的分化状态
侯娜1
侯彬彬2
王秀丽3
刘玉芳1
郭昕4
林茂2
许雪珠2
1.大连大学附属中山医院皮肤科,辽宁省大连市,1160012.大连医科大学附属第二医院皮肤科,辽宁省大连市,1160273.大连医科大学基础医学院,辽宁省大连市,1160444.中科院大连化学物理研究所生物技术部1802组,辽宁省大连市,116021
摘要：背景：研究证实YY1主要在小鼠基底层未分化表皮细胞中表达，且随着表皮细胞向基底上层分化其表达逐渐下降，这种差异性表达方式说明YY1可能是表皮细胞分化过程中重要的调节因子之一。<br> 目的：采用慢病毒-YY1感染HaCaT细胞观察YY1过表达对细胞分化的影响。<br> 方法：将慢病毒-YY1感染至HaCaT细胞，经puromycin筛选，建立单克隆稳定细胞株，设对照组为慢病毒感染的HaCaT细胞和未感染的HaCaT细胞，Western blot检测分析YY1蛋白的表达水平；将慢病毒-YY1-HaCaT组和 HaCaT-YY1组细胞各分成2组，一组在低钙(0.12 mmol/L)培养基条件下培养48 h，另一组在低钙(0.12 mmol/L)培养基条件下培养24 h后在高钙(0.35 mmol/L)培养基条件下再培养24 h，用Western blot法检测YY1过表达对HaCaT细胞分化中的表皮细胞特异性分化角蛋白K1、K10、K14和晚期分化产物外皮蛋白、中间丝相关蛋白、兜甲蛋白的影响。<br> 结果与结论：慢病毒-YY1成功感染HaCaT细胞，高钙条件下获得的单克隆细胞株过表达YY1蛋白，可抑制K1、外皮蛋白和兜甲蛋白的合成，从而阻止表皮细胞角质化进程并使细胞处于未分化状态。结果说明慢病毒可高效感染皮肤人永生化表皮细胞株 HaCaT 细胞，YY1可能是抑制基底表皮细胞分化并维持其未分化增殖状态的重要因子之一。
关键词：组织构建组织工程HaCaT细胞YY1慢病毒角蛋白感染国家自然科学基金
分类号：R318(医用一般科学)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 4625-4629 )
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