体外大鼠肝卵圆细胞的长期培养方法
尹寿新1
周震2
马美雪3
杨景波1
羊东晔1
1.中南大学湘雅二医院消化内科,湖南省长沙市,4100112.长沙市第一医院消化内科,湖南省长沙市,4100053.徐州市中心医院消化内科,江苏省徐州市,221009
摘要:背景:肝卵圆细胞是目前公认的成体肝干/祖细胞,但其体外长期培养时会不可避免地丢失干细胞的活性。
<br> 目的:探索大鼠肝卵圆细胞体外长期培养的方法。
<br> 方法:构建2-乙酰胺基芴/部分肝切除肝再生大鼠模型,通过酶消化和Percol 梯度离心分离纯化大鼠异质卵圆细胞并进行免疫染色鉴定,用含表皮生长因子、白血病抑制因子的培养基体外长期培养,后撤去表皮生长因子、白血病抑制因子,通过形态学的观察和分子标志物的检测判断其能否保持干/祖细胞活性。
<br> 结果与结论:采用含表皮生长因子、白血病抑制因子的培养基体外培养卵圆细胞4个月后,大鼠异质卵圆细胞仍能表达肝细胞标志物ALB、胆管上皮细胞标志物CK-19,经不含表皮生长因子、白血病抑制因子的培养液继续培养后,卵圆细胞胎肝标志AFP表达量迅速下降。该研究结果表明大鼠肝卵圆细胞在表皮生长因子、白血病抑制因子等培养条件下可长期增殖并保持干细胞活性。
关键词:组织构建组织工程卵圆细胞长期培养表皮生长因子白血病抑制因子国家自然科学基金
分类号:R318(医用一般科学)
论文发表日期:2014-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 4663-4668 )
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