脂质体介导转染N2a细胞的优化方法
赵云鹤1
王若楠2
杨桂姣1
陆利1
1.山西医科大学人体解剖学教研室,山西省太原市,0300012.山西医科大学七年制临床医学系,山西省太原市,030001
摘要：背景：阳离子脂质体介导的细胞转染具有结果可靠、可重复性强的特点，但面临一个共同的缺点，就是转染效率常较低。<br> 目的：探讨阳离子脂质体转染N2a细胞(小鼠神经胶质瘤细胞)的优化方法。<br> 方法：采用24孔培养板，1.5μL阳离子脂质体Lipofectamine?LTX介导，通过贴壁法和悬浮法，将500 ng带有绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组质粒pcDNA3-GFP转入N2a细胞，倒置荧光显微镜观察细胞内绿色荧光蛋白表达情况，并比较二者转染效率。采用悬浮转染法，将500 ng质粒DNA分别用1.0，1.5，2.0，2.5μL Lipofectamine?LTX进行转染，探讨最适脂质体和DNA比例。<br> 结果与结论：1.5μL脂质体/500 ng DNA，悬浮法转染效率显著高于贴壁法转染效率(P<0.01)；1.0，1.5，2.0，2.5μL Lipofectamine?LTX对500 ng质粒DNA的转染效率分别为(76.60±3.85)%，(80.00±4.17)%，(88.00±5.89)%，(54.96±4.23)%，提示脂质体2.0μL与质粒DNA 500 ng的转染效率最高。
关键词：组织构建组织工程脂质体贴壁转染悬浮转染N2a细胞绿色荧光蛋白
分类号：R318(医用一般科学)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 4669-4674 )
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