颅骨来源骨髓基质干细胞的分离培养方法
丁冬1
梁军2
张际绯1
1.牡丹江师范学院生命科学与技术学院,黑龙江省牡丹江市,1570112.牡丹江医学院组织学与胚胎学教研室,黑龙江省牡丹江市,157011
摘要：背景：从小鼠颅骨提取的一类骨髓基质干细胞称为PA6细胞，研究者发现当PA6细胞与其他干细胞共培养时可向神经细胞分化，此特性可被应用于神经损伤部位的修复。所以，PA6细胞越来越受到研究者的关注，但目前国内对类似骨髓基质干细胞PA6的提取方法鲜见报道。目的：分离培养SD大鼠颅骨来源的骨髓基质干细胞，体外观察细胞形态并免疫荧光鉴定。方法：无菌条件下，取新生的SD大鼠颅骨将其剪碎，用含体积分数为10%胎牛血清的DMEM培养液冲洗颅骨碎片，反复吹打制成单细胞悬液，将其置于培养瓶中培养，多次换液培养纯化细胞。取第2代生长均一的细胞，倒置显微镜下观察细胞形态，并用免疫荧光染色法进行细胞表面标记鉴定。结果与结论：原代细胞培养24 h后，骨髓基质干细胞开始贴壁；3 d后细胞数量增多，形态呈不规则形、多角形、三角形和扁平形；细胞传代后，形态基本均一，细胞排列呈放射状和束状，贴壁能力较强，部分细胞呈聚集生长，增殖速度比原代有明显的加快。免疫荧光染色检测CD105、CD73、CD44、CD90表达呈阳性， CD45、CD34、CD14和HLA-DR表达呈阴性，证实了提取的细胞为骨髓基质干细胞。
关键词：干细胞骨髓干细胞颅骨骨髓基质干细胞细胞培养分离鉴定
分类号：R394.2(医学遗传学)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 5103-5107 )
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