慢病毒介导骨形态发生蛋白2基因转染大鼠骨髓内皮祖细胞
尹秀茹
裴凌
梁佐迪
1.中国医科大学附属第一医院,辽宁省沈阳市,1100012.中国医科大学附属第一医院,辽宁省沈阳市,1100013.中国医科大学附属第一医院,辽宁省沈阳市,110001
摘要:背景:基因治疗已成为疾病治疗的新趋势,为某些难治性疾病带来了曙光,合适的细胞、基因及载体的选择是治疗的关键。目的:探讨慢病毒介导骨形态发生蛋白2基因转染大鼠骨髓内皮祖细胞应用于基因治疗的有效性和可行性。方法:从SD大鼠骨髓分离、培养、鉴定内皮祖细胞,采用构建的慢病毒载体(LV)将空载体(LV-eGFP)或骨形态发生蛋白2基因(LV-eGFP-BMP2)转染至内皮祖细胞,通过eGFP荧光检测转染效率。ELISA法检测上清液中骨形态发生蛋白2蛋白的分泌,Western blot法检测细胞骨形态发生蛋白2蛋白的表达,比较转染后细胞的迁移、增殖和抗凋亡能力。结果与结论:慢病毒介导骨形态发生蛋白2载体的转染效率可达90%。与正常内皮祖细胞、转染空载体内皮祖细胞比较,转染骨形态发生蛋白2基因的内皮祖细胞分泌和表达骨形态发生蛋白2蛋白增加(P<0.01),迁移和增殖能力无明显改变(P >0.05),肿瘤坏死因子α损伤后的细胞凋亡率明显降低(P <0.05)。结果表明慢病毒介导骨形态发生蛋白2载体可成功转染内皮祖细胞,转染后可增加内皮祖细胞分泌和表达骨形态发生蛋白2蛋白,增强对炎性损伤的抗凋亡能力,对迁移能力和增殖活性无明显影响。
关键词:干细胞培养内皮祖细胞骨形态发生蛋白2慢病毒载体基因转染国家自然科学基金
分类号:R394.2(医学遗传学)
资助基金:国家自然科学基金(81071530)
论文发表日期:2014-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 5197-5202 )
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中国组织工程研究

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北大核心CSTPCD
ISSN:2095-4344
年,卷(期):2014,(32)
所属栏目:技术与方法 -- 干细胞培养与分化