绿色荧光蛋白转基因大鼠骨髓间充质干细胞的分离鉴定
王阳
曹志强
1.解放军沈阳军区总医院泌尿外科,辽宁省沈阳市,1108402.解放军沈阳军区总医院泌尿外科,辽宁省沈阳市,110840
摘要:背景:转基因动物提取的间充质干细胞自身携带绿色荧光蛋白,与传统病毒、质粒转染相比,能在活细胞中稳定地表达,可较快筛选其修饰的细胞。目的:观察绿色荧光蛋白转基因大鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性。方法:取2周龄的绿色荧光蛋白转基因大鼠双侧长骨骨髓,采用全骨髓贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞。流式细胞术分析第5代绿色荧光蛋白阳性骨髓间充质干细胞的细胞表型,并分别加入成骨及成脂条件培养液进行体外多向诱导分化,采用茜素红钙盐染色和油红O染色进行鉴定。结果与结论:成功获得了稳定表达绿色荧光蛋白的骨髓间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表达 CD90和CD105,不表达或弱表达CD14和CD45。经成骨诱导3周后茜素红染色可见有橘红色钙盐沉积,经成脂诱导3周后油红O染色见红色的脂滴。结果表明稳定表达的绿色荧光蛋白未影响到骨髓间充质干细胞的多向分化潜能,可作为良好的示踪因子。
关键词:干细胞骨髓干细胞绿色荧光蛋白骨髓间充质干细胞转基因大鼠细胞表型成骨分化成脂分化辽宁省自然科学基金
分类号:R394.2(医学遗传学)
资助基金:辽宁省自然科学基金项目(2013020199)
论文发表日期:2014-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 5923-5928 )
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