小鼠胚胎成纤维细胞的分离培养及饲养层制备
胡三强1
王妍妍2
马永宾2
胡嘉波2
1.连云港市妇幼保健院检验科,江苏省连云港市,2220002.江苏大学医学院,江苏省镇江市,212013
摘要：背景：建立一种既可以大量制备，又易于保存并保持较高活性的饲养层细胞是人胚胎干细胞培养研究的重要环节。<br> 目的：建立昆明小鼠胚胎成纤维细胞的最佳分离培养方法，评价其用于人胚胎干细胞饲养层研究的可行性。方法：用不同浓度胰蛋白酶分步消化法体外分离和培养昆明小鼠胚胎成纤维细胞，观察其生物学特性，制备胚胎成纤维细胞饲养层，检测人胚胎干细胞在饲养层上培养的生长状态。<br> 结果与结论：制备昆明小鼠胚胎成纤维细胞饲养层的最佳胎龄为13.5 d。不同浓度胰蛋白酶分步消化法制备的胚胎成纤维细胞生长状态好，获得的成纤维细胞纯度高，增殖活跃。冻存2周，1，3，6个月内复苏的细胞存活率差异无显著性意义。小鼠胚胎成纤维细胞在第2-4代增殖旺盛，第5代以后细胞增殖活力明显下降。人胚胎干细胞在小鼠胚胎成纤维细胞长期传代后呈典型的未分化形态，碱性磷酸酶和过碘酸-雪夫染色均为阳性。结果表明建立的昆明小鼠胚胎成纤维细胞饲养层分离培养法可为人胚胎干细胞扩增提供稳定、优质的饲养层细胞。
关键词：干细胞培养人胚胎干细胞小鼠胚胎成纤维细胞饲养层国家自然科学基金
分类号：R394.2(医学遗传学)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 7306-7311 )
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