不同浓度血管紧张素Ⅱ诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞的定向分化
石静宝
邢万红
1.山西医科大学第二医院心胸外科,山西省太原市,0300012.山西医科大学第二医院心胸外科,山西省太原市,030001
摘要：背景：血管紧张素Ⅱ诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞定向分化的实验研究还较少，目前对于这种新的诱导剂在实验应用中没有一个统一的浓度标准，所以诱导结果有一定的差异。<br> 目的：探讨血管紧张素Ⅱ诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞的最佳浓度。<br> 方法：采用密度梯度离心+贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞，将第3代骨髓间充质干细胞分为0.05，0.1，0.2，0.5μmol/L血管紧张素Ⅱ组和对照组，血管紧张素Ⅱ各组接种后24 h加相应的诱导剂诱导24 h后，完全培养液连续培养4周，对照组只用完全培养液培养。采用MTT法检测各组第1，3，5，7天的吸光度值，计算各诱导组的细胞增殖抑制率。不同浓度血管紧张素Ⅱ诱导第1，4周时，免疫荧光细胞化学染色法检测心肌特异蛋白cTnT、β-MHC的表达，RT-PCR检测各组诱导培养4周时心肌早期转录因子GATA-4、Nkx2-5的表达。<br> 结果与结论：各诱导组间的细胞增殖曲线相似，第5天0.05μmol/L血管紧张素Ⅱ组细胞增殖抑制率开始出现负值，与其他组比较差异有显著性意义(P <0.05)。第5，7天0.1μmol/L血管紧张素Ⅱ组细胞增殖抑制率明显低于0.2，0.5μmol/L血管紧张素Ⅱ组(P <0.05)。经4种浓度血管紧张素Ⅱ诱导的骨髓间充质干细胞均表达心肌特异蛋白cTnT、β-MHC，对照组阴性。诱导培养1周，0.5μmol/L血管紧张素Ⅱ组cTnT、β-MHC蛋白阳性表达率明显高于0.05μmol/L组(P <0.05)。诱导培养4周，0.1μmol/L血管紧张素Ⅱ组的cTnT、β-MHC蛋白阳性表达率与0.2μmol/L血管紧张素Ⅱ组差异无显著性意义(P >0.05)。RT-PCR检测各组骨髓间充质干细胞经不同浓度血管紧张素Ⅱ诱导培养4周后心肌早期转录因子GATA-4、Nkx2-5均有表达，对照组阴性。结果表明经血管紧张素Ⅱ诱导的骨髓间充质干细胞表达心肌特异蛋白 cTnT、β-MHC 及心肌特异转录因子GATA-4、Nkx2-5，诱导分化适宜浓度为0.1μmol/L。
关键词：干细胞骨髓干细胞心肌样细胞血管紧张素Ⅱ诱导分化
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：the Science and Technology Plan of Shanxi Province, (No.20120313021-3)Shanxi Scientific Research Fund for Returned Scholars, (No.2012091)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 8072-8079 )
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