Lentivirus载体对许旺细胞的转染效率
连小峰1
徐建广1
曾炳芳1
周蔚1
孔维清1
张涛1
侯铁胜2
1.上海市第六人民医院,上海市,2002332.上海长海医院,上海市,200433
摘要:背景:近年来研究较多的LV载体,因其强大的转染能力以及较高的转染效率等特点,在基因转染的实验中应用越来越广泛。<br>  目的:进一步验证Lentivirus载体在体外对原代许旺细胞的转染效率。<br>  方法:以Lentivirus三质粒系统构建病毒载体,在体外分别以MOI值为1,5,10,20,40对原代大鼠许旺细胞进行转染,转染后第1,3,5,7,9天在荧光显微镜下观察Lentivirus携带的荧光表达情况,并在显微镜的计数方格内计算细胞的转染情况。发出绿色荧光的为转染成功的许旺细胞,否则认为没有转染病毒载体的,从而算出转染效率。<br>  结果与结论:在病毒转染3 d后,在各不同MOI值的培养孔中,均能观察到极少量的荧光反应,在第5天时,荧光数量较前明显增多。第7天时达到高峰,第9天的荧光数量与第7天变化不明显。从细胞转染效率来看,不同的MOI值明显不同,MOI值为1时的转染效率约为45%,MOI值为5时为80%,MOI值为10时为90%, MOI值为20时为78%,MOI值为40时转染效率为70%。
关键词:组织构建组织工程许旺细胞Lentivirus病毒病毒载体感染复数转染效率细胞培养脊髓损伤绿色荧光蛋白国家自然科学基金
分类号:R318(医用一般科学)
论文发表日期:2014-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 8301-8304 )
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中国组织工程研究

中国组织工程研究

北大核心CSTPCD
ISSN:2095-4344
年,卷(期):2014,(51)
所属栏目:技术与方法 -- 组织构建细胞学实验