干细胞相关因子在大鼠卵巢颗粒细胞中的表达
刘慧萍
林政桦
张国民
喻嵘
刘文娥
李玲
谷旭宇
1.湖南中医药大学中医方证研究转化医学实验室,湖南省长沙市,4102082.湖南中医药大学中医方证研究转化医学实验室,湖南省长沙市,4102083.湖南中医药大学中医方证研究转化医学实验室,湖南省长沙市,4102084.湖南中医药大学中医方证研究转化医学实验室,湖南省长沙市,4102085.湖南中医药大学中医方证研究转化医学实验室,湖南省长沙市,4102086.湖南中医药大学中医方证研究转化医学实验室,湖南省长沙市,4102087.湖南中医药大学中医方证研究转化医学实验室,湖南省长沙市,410208
摘要：背景：现有研究表明，人与大鼠卵巢优势卵泡中的颗粒细胞具有表达干细胞特性的现象。目的：探讨干细胞相关因子在大鼠卵巢颗粒细胞中的表达。方法：将大鼠卵巢组织制作石蜡切片后，使用免疫组化法检测CD34，CD133，ABCG2/Bcrp1，Pou5f1/Oct-4的表达。卵泡穿刺法获取颗粒细胞，并使用免疫组化法检测FSHR受体的表达以鉴定颗粒细胞的纯度。免疫组化法检测颗粒细胞 CD44， C-Kit 的表达情况， RT-PCR 检测卵巢组织与颗粒细胞 ABCG2/Bcrp1、Pou5f1/Oct-4、Nanog基因的表达情况。结果与结论：免疫组化法石蜡切片显示部分卵巢颗粒细胞CD34，CD133，ABCG2/Bcrp1，Pou5f1/Oct-4阳性表达，而Pou5f1/Oct-4蛋白的表达在卵泡发育的周期中逐步增多，并在黄体化的时候显著增强，形成白体后则消失，因而具有周期性表达的特点。卵泡穿刺法提取的原代颗粒细胞FSHR受体鉴定阳性率在95%以上。体外培养的颗粒细胞以长梭形或菱形为主，部分细胞有聚集生长现象，且 CD44，C-Kit 阳性表达。RT-PCR检测结果显示，卵巢组织与体外培养的颗粒细胞均不表达 Nanog，卵巢低表达 Pou5f1/Oct-4，强烈表达ABCG2/Bcrp1，颗粒细胞微弱表达Pou5f1/Oct-4，而ABCG2/Bcrp1表达较强。以上结果显示大鼠卵巢中的部分颗粒细胞具有干细胞的特性。
关键词：干细胞培养卵巢颗粒细胞干细胞样细胞干细胞特性集落现象阳性标志物体外培养国家自然科学基金
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：国家自然科学基金资助项目(81303123)中国博士后基金项目(2013T60770，2012M511382)高等学校博士学科点专项科研基金项目(20114323120007)湖南省重点实验室开放基金(2014XNFZ06)the National Natural Science Foundation of China, (No.81303123)China Postdoctoral Science Foundation, (No.2013T60770,2012M511382)Specialized Research Fund for the Doctoral Program of Higher Education, (No.20114323120007)the Hunan Provincial Key Laboratory Foundation, (No.2014XNFZ06)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 78-84 )
英文信息