小鼠脾脏B淋巴细胞纯化培养方法的建立
李文娟
邹家琦
韩欣欣
田志辉
刘杰
李海东
1.天津医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系,天津市,3000702.天津医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系,天津市,3000703.天津医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系,天津市,3000704.天津医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系,天津市,3000705.天津医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系,天津市,3000706.天津医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系,天津市,300070
摘要：背景：B淋巴细胞是机体免疫系统重要的参与者，目前的研究主要采用磁珠、补体等方法进行B淋巴细胞的分离纯化，但是这些方法费用高或者细胞损伤大、纯度低，体外分离、培养B淋巴细胞的方法还有待进一步改进。目的：探讨从小鼠脾脏细胞中对 B 淋巴细胞同时进行分离、培养的方法。采用加入白细胞介素4、脂多糖或者CD3单克隆抗体及其组合，探讨体外分离、培养小鼠脾脏B淋巴细胞的适宜条件。方法：体外分离培养小鼠脾脏细胞，随机分为7组，分别用白细胞介素4，CD3，脂多糖，白细胞介素4+CD3，白细胞介素4+脂多糖，CD3+脂多糖组进行干预、将未给予刺激的脾细胞作为对照组。用流式细胞仪检测在不同培养条件下小鼠脾脏细胞T、B淋巴细胞及其亚群的变化。结果与结论：与对照组比较，白细胞介素4组淋巴细胞在培养后第3-5天数量达到高峰；脂多糖组在培养初期无明显作用，第3天开始淋巴细胞数量有明显的增加，第5天达到高峰；培养体系中加入CD3单克隆抗体，可导致T淋巴细胞消失，培养2 d后，可得到较为单一的B淋巴细胞，其细胞数量在第3天达到高峰。其中B220+IgD+成熟B淋巴细胞亚群数量显著增加。体外培养24 h后，各组B220+CD93+Transitional B淋巴细胞亚群均完全消失。结果说明，体外培养的小鼠脾脏细胞加入CD3单克隆抗体和白细胞介素4可以去除T淋巴细胞，并维持成熟B淋巴细胞的生存和增殖。
关键词：组织构建组织工程小鼠脾脏B淋巴细胞T淋巴细胞培养CD3单克隆抗体白细胞介素4脂多糖流式细胞术国家自然科学基金
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：No.81070271基金资助国家自然科学基金资助项目(81070271)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 207-212 )
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