在Hela细胞中验证miRNA-21对TLR4的调控
赵婧1
岳鹏2
黄家芳1
汪玉涛1
马婷1
陈宝荣1
1.北京航天总医院检验科,北京市,1000762.防化学院门诊部,北京市,102205
摘要:背景:miRNA通过调节特异靶基因的表达,在疾病的发展及预后中起着重要作用。目的:探索miRNA-21在宫颈癌Hela细胞中对TLR4基因的调控关系。方法:通过 miRNA 靶基因预测网站寻找可能与 miRNA-21相互作用的靶基因,利用已构建的携带pri-miRNA-21基因重组腺病毒载体,包装并大量扩增病毒感染 Hela 细胞,检测荧光蛋白的表达水平,提取感染48 h蛋白,通过Western印迹检测TLR4蛋白表达。从蛋白水平验证在Hela细胞中miRNA-21与靶基因TLR4的靶向调控关系。结果与结论:100 MOI的重组腺病毒pAd/pri-miRNA-21、pAd/neg可以成功感染Hela细胞。生物信息学方法显示miRNA-21和TLR4存在可能的结合位点。发现感染pAd/pri-miRNA-21组与对照组pAd/neg及空白组相比,TLR4蛋白的表达量明显降低。证实了miRNA-21可以负调节靶基因TLR4的表达。
关键词:组织构建组织工程重组腺病毒载体pri-miRNA-21TLR4基因Hela细胞靶基因
分类号:R318(医用一般科学)
论文发表日期:2015-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 220-224 )
英文信息
