红色荧光基因慢病毒转染骨髓间充质干细胞：表达21 d对细胞活性无影响
尹飚
杨逸禧
杨波
王簕
黎双庆
杨富国
1.广州医科大学附属第三医院骨科,广东省广州市,5101502.广州医科大学附属第三医院骨科,广东省广州市,5101503.广州医科大学附属第三医院骨科,广东省广州市,5101504.广州医科大学附属第三医院骨科,广东省广州市,5101505.广州医科大学附属第三医院骨科,广东省广州市,5101506.广州医科大学附属第三医院骨科,广东省广州市,510150
摘要：背景：掌握转染的最佳感染复数和产生较强荧光强度的时间，可为后期观察人骨髓间充质干细胞在动物模型体内的示踪奠定基础。目的：探讨HIV-1来源的慢病毒携带增强型红色荧光蛋白转染人骨髓间充质干细胞的可行性。方法：将第4代人骨髓间充质干细胞分成空白组和感染复数为2，3，4组，以细胞数5.0×105个接种于12孔培养皿，添加含有体积分数为1%胎牛血清的成人骨髓间质干细胞完全培养基1 mL。调整慢病毒携带增强型红色荧光蛋白感染滴度为1.0×1011 TU/L，加入各组培养皿中病毒液体积分别为10，15，20μL，感染复数分别为2，3，4，空白组加入10μL PBS。转染后24，72 h荧光倒置显微镜观察细胞红色荧光表达情况并计算出转染率。结果与结论：增强型红色荧光蛋白在骨髓间充质干细胞中稳定表达，转染后24 h倒置荧光显微镜下可见红色荧光，72 h荧光达到最强，细胞转染率与感染复数值呈线性增长关系。转染后21 d内，各转染实验组的人骨髓间充质干细胞数量与空白组比较差异无显著性意义(P >0.05)，以上结果提示采用 HIV-1来源的慢病毒载体介导增强型红色荧光蛋白转染标记人骨髓间充质干细胞是可行的，当感染复数为4时转染效率高并可持续表达至少21 d，且标记后对其增殖活性无影响。
关键词：干细胞骨髓干细胞慢病毒增强型红色荧光基因人骨髓间充质干细胞转染国家自然科学基金
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：国家青年科学基金项目(31200726)广州市应用基础研究项目(2013J4100101)Funding(No.31200726)the Basic Research for Application of Guangzhou City, (No.2013J4100101)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1539-1543 )
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