骨膜细胞与髓核细胞共培养向成骨方向的分化
杨宇明1
袁峰2
陆海涛1
张峻伟1
盛晓磊1
李智多1
1.徐州医学院研究生学院,江苏省徐州市,2210002.徐州医学院附属医院,江苏省徐州市,221000
摘要：背景：骨膜细胞已被应用于骨缺损及修复，但其可否在成骨诱导环境中与髓核细胞共培养向成骨分化，并应用于椎间隙骨性融合的相关研究报道较少。<br> 目的：分离培养髓核细胞与骨膜细胞，观察特定环境下髓核细胞的成骨潜能，以及加入骨膜细胞与其共培养后的成骨能力。<br> 方法：Ⅱ型胶原酶消化离心贴壁法分离兔髓核细胞；组织贴壁培养法分离兔骨膜细胞。采用细胞表面抗原CD90、CD105免疫荧光染色法鉴定骨膜细胞，甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学鉴定髓核细胞。实验分为两组：成骨诱导环境单独培养的髓核细胞为对照组，加入骨膜细胞与髓核细胞共培养为实验组。CCK8法检测细胞增殖，分别行碱性磷酸酶、茜素红染色、Ⅰ型胶原免疫组织化学染色进行成骨鉴定，Western blot检测两组细胞成骨诱导后骨桥蛋白的表达。<br> 结果与结论：骨膜细胞表面抗原CD90、CD105呈阳性，髓核细胞甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原染色阳性；1，3，5，7，9 d各时间点实验组髓核细胞增殖活性显著高于对照组；诱导2周后2组细胞碱性磷酸酶染色、茜素红染色及Ⅰ型胶原免疫组织化学染色均为阳性，但实验组阳性表达高于对照组(P<0.05)；实验组骨桥蛋白表达强于对照组。髓核细胞具有成骨分化的潜能，但体外的增殖能力较低，加入骨膜细胞后，共培养细胞增殖分化能力提高。成骨诱导下骨膜细胞与髓核细胞共培养具有良好相容性，细胞相互黏附，并具有强于单独诱导髓核细胞的成骨能力。
关键词：组织构建骨细胞髓核细胞骨膜细胞共培养成骨分化增殖分化黏附骨形态发生蛋白7组织工程
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：江苏省卫生厅项目(H201129)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 5916-5922 )
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