小鼠乳鼠原代心肌细胞的改良培养
孟琳琳1
黄莺1
马依彤1
刘芬2
陈邦党2
陈小翠2
盖敏涛2
1.新疆医科大学第一附属医院心脏中心冠心病二科,新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市,8300542.新疆医科大学第一附属医院心脏中心科技楼冠心病实验室,新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市,830054
摘要：背景：大鼠心肌细胞原代培养技术日渐成熟，但小鼠心肌细胞在同样实验条件下不易获得，而小鼠基因组与人类基因组有更多相似之处，具有更高的研究价值。<br> 目的：改进小鼠乳鼠原代心肌细胞的培养方法，得到纯度高、活力强、保持心肌细胞原有结构和功能的心肌细胞。<br> 方法：将小鼠心肌组织利用酶消方法分离为单个的心肌细胞，实验步骤中将经典的胰酶、胶原蛋白酶混合酶消法分解开，先用胰酶消化心肌组织，使心肌组织变得松散，再用胶原蛋白酶，作用于细胞间质的胶原纤维，使心肌组织分离为单个的心肌细胞。调整胰酶和Ⅱ型胶原蛋白酶的浓度和作用时间，严格控制试剂pH值和各步骤的温度。<br> 结果与结论：心肌细胞在接种24 h后开始贴壁，48 h后可观察到部分心肌细胞出现自主搏动，72 h后彼此形成交联，96 h后可观察到心肌细胞形成细胞簇，并出现一致性搏动。心肌细胞的存活率和纯度均达95%以上。结果证实，实验采用改良方法成功培养出小鼠乳鼠心肌细胞，并且保留心肌细胞的结构和功能，纯度和成活率高，是可行的培养方法。
关键词：组织构建组织工程心肌细胞小鼠乳鼠原代细胞培养酶消法Ⅱ型胶原蛋白酶作用时间心肌搏动细胞簇温度pH值国家自然科学基金
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：国家自然科学基金(81260022)新疆维吾尔自治区自然科学基金(2014211C040)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 5993-5997 )
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