新生大鼠脊髓运动神经元的纯化培养与鉴定
杨林
刘阳
吕德成
1.大连医科大学/大连医科大学附属第一医院,辽宁省大连市,1160242.大连医科大学/大连医科大学附属第一医院,辽宁省大连市,1160243.大连医科大学/大连医科大学附属第一医院,辽宁省大连市,116024
摘要:背景:神经元是有丝分裂后的细胞,体外培养很难存活。脊髓运动神经元的分离、纯化和培养同时也是细胞培养的技术难点。目的:建立新生大鼠脊髓运动神经元培养体系,并予以分类鉴定和测定其纯度。方法:取新生大鼠脊髓腹侧组织分离成细胞悬液,经密度梯度离心及差速贴壁后纯化培养,采用免疫细胞化学双标染色法对培养盖片上的细胞予以鉴定、分类,结合Hoechst荧光染核,计数各细胞成分的含量。结果与结论:细胞贴壁生长良好,神经元占85.8%,其中运动神经元达71.6%,星形胶质细胞占7.8%,NF200和胶质纤维酸性蛋白染色皆为阴性的细胞占6.4%。结果说明,取新生大鼠腹侧脊髓组织结合密度梯度离心及差速贴壁接种法可以培养出高纯度的脊髓运动神经元。
关键词:组织构建组织工程运动神经元免疫化学纯化培养新生大鼠辽宁省自然科学基金
分类号:R318(医用一般科学)
资助基金:辽宁省自然科学基金(2013023035)大连市科技计划项目(2013E15SF171)Funding(No.2013023035)the Science and Technology Project of Dalian, (No.2013E15SF171)
论文发表日期:2015-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 6782-6786 )
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