兔主动脉血管内皮细胞原代改良提取法
肖紫春
谭金海
周益
1.武汉大学中南医院骨科,湖北省武汉市,4300712.武汉大学中南医院骨科,湖北省武汉市,4300713.武汉大学中南医院骨科,湖北省武汉市,430071
摘要：背景：目前血管内皮细胞原代获取方法中，使用较多的就是大动脉血管内皮细胞培养及微动脉血管内皮细胞培养，传统多采用酶消化法及组织贴壁法，所获得血管内皮细胞数量和纯度已经不能满足科研实验的需要。<br> 目的：探讨兔主动脉血管内皮细胞的原代的改良提取及鉴定方法。<br> 方法：切取一段兔主动脉，甲组采用改良提取法培养血管内皮细胞，显微器械剥离出血管内层，再用酶消化法获得单个原代细胞，以内皮细胞培养液培养；乙组采用组织贴壁法生长，整个血管内面贴于培养皿中，同时于体积分数5%CO2，37℃温箱中孵育1 h。分别获得2组细胞沉淀并进行体外培养。采用显微镜观察细胞形态，通过免疫组织化学染色检测CD31、Ⅷ因子及Vimentin蛋白进行血管内皮细胞鉴定，并与组织贴壁生长法培养对比。<br> 结果与结论：采用改良提取法得出的内皮细胞纯度比组织贴壁生长高，数量更多。免疫组织化学鉴定结果CD31(+)，Ⅷ因子(+)，Vimentin蛋白(-)。结果表明此法可以更容易获得纯度较高，数量更多的血管内皮细胞，可操作性及实用性较强。
关键词：组织构建血管内皮细胞兔主动脉酶消化法改良提取湖北省自然科学基金
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：湖北省自然科学基金重点项目(2014CFA084)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1019-1024 )
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