制备小鼠去细胞拟胚体对Lewis肺癌细胞的促分化作用
吕卫东1
蔡琳2
张家东3
雷光焰1
刘志刚1
张新伟1
陆建荣2
1.陕西省肿瘤医院 胸外科,陕西省西安市,7100612.陕西省肿瘤医院 病理科,陕西省西安市,7100613.陕西省肿瘤医院 胸外科,陕西省西安市 710061; 陕西中医学院附属医院,陕西省咸阳市 712046
摘要:背景:胚胎干细胞或胚胎组织与癌细胞共培养,能够诱导癌细胞分化为正常上皮细胞或恶性程度降低,而去细胞拟胚体保留了胚胎组织的结构和重要细胞因子。<br> 目的:成功制备一种来源于小鼠胚胎干细胞的去细胞拟胚体,探讨去细胞拟胚体在小鼠 Lewis 肺癌细胞体外三维培养中的作用。<br> 方法:先将小鼠胚胎干细胞(D3)动态培养7 d后形成拟胚体,然后用十二烷基硫酸钠进行去细胞处理。小鼠Lewis肺癌细胞与去细胞拟胚体三维共培养7 d,对照组肺癌细胞在Matrigel上三维培养7 d。Ki67免疫组化染色检测细胞增殖情况,Western blot检测Paxilin,E-cadherin蛋白表达水平,RT-PCR检测Slug和E-cadherin mRNA表达水平。<br> 结果与结论:①实验成功制备一种大小均匀的小鼠拟胚体,经十二烷基硫酸钠去细胞处理后,拟胚体的细胞成分完全去除;②小鼠Lewis肺癌细胞在Matrigel上三维培养7 d后形成球形的肿瘤多细胞球体, Ki67免疫组化染色阳性细胞比例高;小鼠Lewis肺癌细胞在去细胞拟胚体支架上三维培养7 d,可见肺癌细胞长入拟胚体,但Ki67阳性细胞比例明显降低;③相对于Matrigel组,去细胞拟胚体组的Paxil in吸光度小于Matrigel组(P<0.05),而E-cadherin吸光度大于Matrigel组(P<0.05);④去细胞拟胚体组的Slug mRNA表达明显低于Matrigel组(P<0.05),而E-cadherin mRNA表达高于Matrigel组(P<0.05);⑤结果表明,去细胞拟胚体对小鼠Lewis肺癌细胞在体外三维培养有促进分化作用。
关键词:组织构建组织工程胚胎去细胞拟胚体Lewis肺癌细胞细胞外基质生物材料三维支架三维培养国家自然科学基金
分类号:R318(医用一般科学)
论文发表日期:2016-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:7( 2972-2978 )
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