兔骨膜细胞分离培养的方法改进
张峻玮1
陆海涛1
袁峰2
杨宇明1
1.徐州医学院研究生学院,江苏省徐州市,2210002.徐州医学院附属医院脊柱外科,江苏省徐州市,221006
摘要：背景：近年来，骨膜作为细胞治疗的种子细胞来源，因其自身的优越性而备受关注。目的：探讨兔骨膜细胞分离培养的最佳方法及其生物学特性。方法：无菌条件下取出兔胫骨内侧面骨膜，以Ⅱ型胶原酶消化结合组织块贴壁法分离培养兔骨膜细胞，置于DMEM/F12完全培养基培养。倒置显微镜观察细胞形态；CCK-8法检测骨膜细胞增殖活性，绘制细胞生长曲线图；流式细胞仪检测细胞表型CD90、CD105；成骨诱导培养基诱导骨膜细胞成骨分化，2周后茜素红染色检测钙结节沉积；成脂诱导培养基诱导骨膜细胞成脂分化，2周后油红O染色检测脂滴颗粒。结果与结论：①Ⅱ型胶原酶消化结合组织块贴壁法原代培养耗时短，提高了组织块成活率；Ⅱ型胶原酶消化结合组织块贴壁法获得的骨膜细胞纯度较高，增殖能力强，呈梭形旋涡状或平形状生长，茜素红染色、油红 O 染色证实骨膜细胞具有多向分化潜能；②结果表明，Ⅱ型胶原酶消化结合组织块贴壁法能够在较短时间内获得高纯度的骨膜细胞，且增殖能力强，细胞具有多向分化能力。
关键词：组织构建骨细胞骨膜细胞分离培养Ⅱ型胶原酶细胞分化
分类号：R318(医用一般科学)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 3523-3528 )
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