周期性张应力作用下软骨细胞半胱氨酸蛋白酶12的表达规律
陈著科
李晓飞
张海宁
1.青岛大学附属医院关节外科,山东省青岛市,2660002.青岛大学附属医院关节外科,山东省青岛市,2660003.青岛大学附属医院关节外科,山东省青岛市,266000
摘要：背景：过度力学刺激可引起细胞内质网应激，内质网应激在退行性疾病的发生发展过程中扮演重要角色，半胱氨酸蛋白酶12是内质网应激的特异性分子，内质网应激的强弱程度可由半胱氨酸蛋白酶12表达水平来体现。目的：观察周期性张应力作用下软骨细胞半胱氨酸蛋白酶12的表达规律。方法：以人软骨细胞为实验对象，对实验细胞成功分组后，运用细胞牵张力学加载系统，将加力组及其配对的相应Z-ATAD-FMK抑制剂组分别给予2，12，24，36，48 h的力学刺激条件，空白组(0 h)及其配对的Z-ATAD-FMK抑制剂组除不加力外培养条件和加力组完全相同。规定加力时间终止后，显微镜下观察细胞形态变化及生长状态，随即采用RT-PCR和Western blot检测各组半胱氨酸蛋白酶12基因和蛋白表达变化规律。结果与结论：①细胞形态学观察结果显示，从加力2 h开始，细胞出现凋亡，到24 h此现象最明显，随着加力时间延长，细胞出现顺应力生长趋势，但细胞凋亡现象减弱。说明周期张应力可以使软骨细胞凋亡，内质网应激可能被激活，细胞体外受力模型建立成功；②半胱氨酸蛋白酶12基因与蛋白随时间延长表达趋势一致，加力24 h表达量达高峰，与空白和抑制剂组相比，差异均有显著性意义(P<0.05)；③以此得出，周期性张应力可引起软骨细胞内质网应激，并影响半胱氨酸蛋白酶12表达。
关键词：组织构建软骨细胞周期性张应力内质网应激半胱氨酸蛋白酶12牵张力学RT-PCR国家自然科学基金
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：国家自然科学基金(81272056)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 4334-4340 )
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