过表达Brahma-相关基因1腺病毒载体对氧化应激诱导心肌细胞凋亡的影响
李素娟1
袁文常2
麦云珮1
侯宁1
1.广州医科大学药学院药理学教研室，广东省广州市 511436; 广州心血管疾病研究所，广东省广州市 5102602.解放军兰州军区乌鲁木齐总医院检验科,新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市,830000
摘要：背景：Brahma-相关基因1是调节染色质重构的重要核蛋白，在糖尿病心肌病中表达降低。<br> 目的：构建大鼠Brahma-相关基因1重组腺病毒载体，评价其在氧化应激诱导原代心肌细胞凋亡中的保护作用。<br> 方法：构建Brahma-相关基因1重组腺病毒载体质粒，经人胚肾293T细胞包装、扩增、计算滴度后，将Brahma-相关基因1重组腺病毒转染入SD乳鼠原代培养心肌细胞，以空载体EGFP转染细胞及正常细胞作为对照，24 h后，荧光显微镜观察转染效率；荧光定量PCR、免疫印迹法检测细胞Brahma-相关基因1mRNA、蛋白表达；24 h后，分别加入100μmol/L H2O2处理12 h，免疫印迹法检测Brahma-相关基因1蛋白表达、凋亡标志物cleaved-Caspase3表达，流式细胞仪检测细胞凋亡率。<br> 结果与结论：①构建的重组腺病毒成功转染至心肌细胞，转染效率达90%以上，被转染细胞的Brahma-相关基因1 mRNA、蛋白表达明显增高；②H2O2可显著抑制心肌细胞Brahma-相关基因1表达，诱导心肌细胞凋亡，刺激心肌细胞cleaved-Caspase3表达；Brahma-相关基因1重组腺病毒可减轻由H2O2导致的上述心肌细胞损伤；③结果表明，氧化应激能直接抑制心肌细胞Brahma-相关基因1表达， Brahma-相关基因1在氧化应激诱导的心肌细胞凋亡中发挥保护作用。
关键词：实验动物心血管及肺损伤与修复动物模型Brahma-相关基因1腺病毒载体糖尿病心肌病氧化应激心肌细胞转染基因治疗国家自然科学基金
分类号：R318(医用一般科学)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 6021-6027 )
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