miR-2135对P19细胞增殖及向心肌细胞分化的作用
李辉
河南省商丘市第一人民医院心血管内科二病区,河南省商丘市,476000
摘要:背景:既往研究发现,向心肌分化P19细胞中的miR-2135表达水平显著高于未分化P19细胞,但miR-2135对P19细胞增殖、向心肌细胞分化和心脏发育的影响尚不明确。<br>  目的:探索miR-2135对P19细胞增殖及向心肌细胞分化的影响。<br>  方法:分别以miR-2135沉默及空载质粒转染P19细胞,培养0-4 d,MTT法检测细胞增殖;培养0,24,48 h,流式细胞仪检测细胞周期。诱导两组转染的P19细胞向心肌细胞分化,诱导第0,10天,采用qRT-PCR检测P19细胞中miR-2135的表达;诱导第10天,采用蛋白免疫印迹检测心肌分化相关标志物心肌肌钙蛋白T、心房钠尿肽和心肌转录因子的表达。<br>  结果与结论:①转染结果:转染miR-2135沉默质粒的P19细胞低表达miR-2135;②细胞增殖与周期:miR-2135沉默质粒转染P19细胞的增殖速度快于空载质粒转染P19细胞(P<0.05),培养24,48 h的S期细胞比例明显高于空载质粒转染P19细胞(P<0.05);③qRT-PCR检测结果:miR-2135沉默质粒转染P19细胞诱导10 d的miR-2135表达明显高于诱导0 d水平(P<0.01);④蛋白免疫印迹检测结果:诱导10 d,miR-2135沉默质粒转染P19细胞心肌肌钙蛋白T、心房钠尿肽和心肌转录因子的表达明显低于空载质粒转染P19细胞;⑤结果表明:miR-2135抑制P19细胞的增殖,可促进其向心肌细胞分化。
关键词:干细胞分化增殖miR-2135P19细胞细胞周期先天性心脏病
分类号:R394.2(医学遗传学)
论文发表日期:2016-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:7( 6814-6820 )
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中国组织工程研究

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北大核心CSTPCD
ISSN:2095-4344
年,卷(期):2016,20(45)
所属栏目:技术与方法 -- 干细胞培养与分化