大鼠C-sis基因克隆及其真核表达载体的构建
孙国芳1
丁浩2
1.南昌大学第二附属医院，心电诊断室，江西省南昌市 3300062.南昌大学第二附属医院，消化内科，江西省南昌市 330006
摘要：背景：原癌基因C-sis具有促进细胞增殖并抑制凋亡，进而促进组织修复的功能。假设C-sis可能在受损肝组织的修复和暴发性肝衰竭的治疗中发挥积极作用。<br> 目的：构建pcDNA3.1/C-sis真核表达载体，检测其在大鼠正常肝细胞株BRL细胞和在体大鼠肝脏细胞中的表达。<br> 方法：通过RT-PCR的方法克隆C-sis基因的选全长编码序列，构建pcDNA3.1/C-sis真核表达载体。鉴定无误后经脂质体介导转染到BRL细胞中，并通过将质粒注入尾静脉后导入大鼠肝脏。最后通过荧光定量PCR和Western Blot鉴定其在BRL细胞和在体大鼠肝脏细胞中的表达。<br> 结果与结论：①成功克隆了C-sis基因全长编码区；测序证明pcDNA3.1/C-sis重组真核表达载体构建成功；②将其转染至BRL细胞和在体大鼠肝脏，可使C-sis表达升高；③实验结果为后续研究C-sis基因对大鼠暴发性肝衰竭的影响提供了先决条件。
关键词：实验动物基因病毒载体相关因子模型基因克隆C-sis大鼠转染真核表达载体酶切脂质体鼠尾静脉国家自然科学基金
分类号：R318(医用一般科学)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 7418-7424 )
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