过表达Shootin1的骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤
张伟1
朱肖奇1
张德才2
1.南方医科大学附属深圳宝安医院,广东省深圳市,5181012.深圳市罗湖区中医院,广东省深圳市,518001
摘要:背景:为解决骨髓间充质干细胞体内分化效率低的问题,拟联合Shootin1基因修饰,希望能有效提高脊髓损伤区内骨髓间充质干细胞神经分化的能力,增加细胞移植治疗脊髓损伤的效果。<br>  目的:探讨过表达Shootin1的骨髓间充质干细胞移植修复脊髓损伤模型大鼠的神经再生能力。<br>  方法:①通过腺病毒转染48 h,使骨髓间充质干细胞过表达Shootin1;②在体外进行神经诱导分化,免疫荧光检测神经巢蛋白(Nestin)与神经元特异性核蛋白(NeuN)的表达;③运用改良Al en 撞击装置制备脊髓撞击损伤模型,造模后半小时在蛛网膜下腔注射Shootin1转染的骨髓间充质干细胞和未转染骨髓间充质干细胞,脊髓损伤对照组仅进行脊髓损伤手术。脊髓损伤5周后取脊髓样本进行冰冻切片检测神经相关标记。结果与结论:①腺病毒转染48 h,免疫荧光与Western Blot检测骨髓间充质干细胞内已成功表达Shootin1蛋白;②体外神经诱导分化7 d,3组细胞形态上均发生了变化,Shootin1转染的骨髓间充质干细胞组和未转染骨髓间充质干细胞组Nestin与NeuN的表达差异不明显;③脊髓撞击损伤大鼠体内实验发现,与对照组相比,细胞移植组BBB评分增高。移植Shootin1转染的骨髓间充质干细胞组和未转染骨髓间充质干细胞组均有Nestin,NeuN,GFAP,MAP-2,ChAT,SYN表达的升高,神经再生能力增强。④实验再次认证了骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的显著性效果,Shootin1蛋白对脊髓损伤后的神经再生及神经功能性恢复起到一定作用,但其对于骨髓间充质干细胞直接移植来说修复差异仍不太明显,优化骨髓间充质干细胞对脊髓损伤的治疗仍需进一步研究。
关键词:干细胞移植脊髓损伤骨髓间充质干细胞Shootin1神经再生
分类号:R394.2(医学遗传学)
资助基金:深圳市科创委项目(JCYJ20130329090921096)
论文发表日期:2016-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:11( 7507-7517 )
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中国组织工程研究

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北大核心CSTPCD
ISSN:2095-4344
年,卷(期):2016,20(50)
所属栏目:技术与方法 -- 干细胞移植