一种新生SD大鼠皮质源性神经元的培养方法
王东艳1
杨金伟2
程敬茹3
马微1
李兴统1
郭建辉2
李力燕1
1.昆明医科大学神经科学研究所,云南省昆明市,6505002.云南省第一人民医院普外二科,云南省昆明市,6500323.昆明理工大学医学院,云南省昆明市,650500
摘要：背景：神经元的体外原代培养在研究神经系统的发育、再生、信号转导机制、神经药理学以及基因表达方面具有极其重要的地位。<br> 目的：建立一种操作更加简单且能够得到较高纯度新生SD大鼠皮质神经元原代培养的方法。<br> 方法：取1 d新生SD大鼠皮质。传统方法实验组：取整个皮质；改良方法实验组：取SD大鼠表面2.0-3.0 mm处皮质。木瓜蛋白酶消化后离心，制备成单细胞悬液，以1×105/孔的浓度接种至含神经元培养液的24孔培养板进行原代培养。培养3 d时采用免疫细胞化学染色方法，使用神经元特异性标志物Tuj1与MAP-2双标记法鉴定所培养的细胞；采用倒置相差显微镜观察6，24，48，72 h及5，7d细胞数和突起长度并记录。<br> 结果与结论：①所培养的细胞可表达神经元特异性标志物Tuj1与MAP-2，因此所培养细胞为神经元，可用于之后实验；②实验组培养至第3天时神经元的纯度已达到峰值92%，而普通实验组神经元的纯度为51%；③2组细胞培养至6 h均已贴壁且长处小突起，培养至第3天时，细胞已初步形成神经网络，培养至5 d时神经网络密集；④研究所用方法简便能够稳定的培养出纯度较高的神经元，可以用于SD大鼠皮质源性神经元的相关实验研究。
关键词：组织构建组织工程皮质神经元SD大鼠细胞培养国家自然科学基金
分类号：R318(医用一般科学)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 7672-7677 )
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