猪心脏瓣膜成肌纤维细胞的分离、鉴定与培养
刘凤丹
胡伟林
陈正平
李永胜
1.华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科,湖北省武汉市,4300002.华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科,湖北省武汉市,4300003.华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科,湖北省武汉市,4300004.华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科,湖北省武汉市,430000
摘要：背景：瓣膜间质细胞是心脏瓣膜中的主要细胞成分，成肌纤维细胞是一种能够表达平滑肌α-平滑肌肌动蛋白和Ⅰ型胶原纤维，并具有一定分化潜能的重要的瓣膜间质细胞，不仅在瓣膜的结构中起着支架作用，尤其在瓣膜的正常生理以及病理应答过程中发挥着重要的调控作用。<br> 目的：建立一套可靠的心脏瓣膜成肌纤维细胞分离、原代培养与鉴定的方法，为心瓣膜钙化等疾病的进一步研究奠定基础。<br> 方法：①从猪心中获取主动脉辨，分别用酶联和消化法、普通酶消化法以及组织块种植法提取猪主动脉瓣瓣膜成肌纤维细胞，进行原代培养；②显微镜观察3种方法培养出的成肌纤维细胞的活性和形态；③用光学显微镜和免疫细胞化学方法鉴定细胞。<br> 结果与结论：①3种方法中，利用胰酶和胶原酶Ⅱ联合消化，然后迅速终止消化的方法获得成肌纤维细胞的活性更高，状态更好，纯度更高；②在荧光显微镜下，观察到获得的主动脉瓣成肌纤维细胞α-平滑肌肌动蛋白染色阳性，抗血管性血友病因子染色阴性，提示培养的细胞为成肌纤维细胞。
关键词：组织构建组织工程瓣膜钙化瓣膜间质细胞成年猪成肌纤维细胞平滑肌细胞细胞培养分离纯化细胞鉴定国家自然科学基金
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：国家自然科学基金(81070190)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 7684-7689 )
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