肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默CD24-CD44+人喉鳞癌干细胞生物学特性的改变
苏静
薛海涛
田君海
张继华
1.河北医科大学第一医院耳鼻喉科,河北省石家庄市,0500002.河北医科大学第一医院耳鼻喉科,河北省石家庄市,0500003.河北医科大学第一医院耳鼻喉科,河北省石家庄市,0500004.河北医科大学第一医院耳鼻喉科,河北省石家庄市,050000
摘要：背景：肿瘤坏死因子受体相关蛋白1的异常表达与多种肿瘤的发生、发展密切相关。因此靶向抑制肿瘤坏死因子受体相关蛋白1的表达成为治疗或干预肿瘤生长的重要靶点。目的：观察肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默对人喉鳞癌干细胞生长及凋亡的影响。方法：采用流式细胞技术特异性分离出CD24-CD44+喉鳞癌干细胞。设计及合成肿瘤坏死因子受体相关蛋白1的siRNA序列，脂质体 TM2000转染CD24-CD44+喉鳞癌干细胞。流式细胞仪、MTT实验、细胞克隆形成实验、TUNEL凋亡实验评价沉默肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因对CD24-CD44+喉鳞癌干细胞增殖、凋亡的影响。结果与结论：①相关因子表达：相比于CD24+CD44-的人喉鳞癌细胞，CD24-CD44+人喉鳞癌干细胞内干性基因OCT4，SOX2，NANOG，肿瘤坏死因子受体相关蛋白1的表达均上调(P<0.05)。RNA干扰后，肿瘤坏死因子受体相关蛋白1的表达显著降低(P<0.05)；②细胞周期及增殖：肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默后人喉鳞癌干细胞的生长速度明显减慢(P<0.05)，细胞停滞在G0/G1期，在S期细胞数减少(P<0.05)， M期细胞无明显变化。肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默后人喉鳞癌干细胞的增殖受到明显的抑制(P<0.05)；③细胞克隆形成能力：相比于未经转染的人喉鳞癌干细胞，肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默后人喉鳞癌干细胞克隆形成能力显著下调(P<0.05)；④细胞凋亡：相比于未经转染的人喉鳞癌干细胞，肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因沉默后人喉鳞癌干细胞的凋亡基因BAD及BAX表达上调(P<0.05)；⑤结果表明，特异性干扰肿瘤坏死因子受体相关蛋白1基因表达可抑制人喉鳞癌干细胞增殖并促进其凋亡。
关键词：干细胞肿瘤干细胞肿瘤坏死因子受体相关蛋白1人喉鳞癌化疗耐药基因沉默细胞数量克隆形成细胞增殖细胞凋亡组织工程
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：河北省重点研发计划自筹项目(152777179)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 663-668 )
英文信息