基因重组腺病毒载体与慢病毒载体转染兔骨髓间充质干细胞的对比
李诗鹏
李强
石正松
蔡伟良
宁寅宽
陶旋
1.桂林医学院附属医院急诊创伤外科,广西壮族自治区桂林市,5410012.桂林医学院附属医院急诊创伤外科,广西壮族自治区桂林市,5410013.桂林医学院附属医院急诊创伤外科,广西壮族自治区桂林市,5410014.桂林医学院附属医院急诊创伤外科,广西壮族自治区桂林市,5410015.桂林医学院附属医院急诊创伤外科,广西壮族自治区桂林市,5410016.桂林医学院附属医院急诊创伤外科,广西壮族自治区桂林市,541001
摘要：背景:腺病毒载体和慢病毒载体均是较好的组织工程基因载体,两者在介导骨形态发生蛋白2转染兔骨髓间充质干细胞中的差异尚待探究.目的:比较腺病毒和慢病毒载体介导EGFP/骨形态发生蛋白2转染体外培养兔骨髓间充质干细胞的转导效率、持续时间及外源基因表达差异.方法:将第5代兔骨髓间充质干细胞分3组培养,A组以腺病毒载体介导EGFP/骨形态发生蛋白2(Ad-EGFP/BMP-2)转染细胞,B组以慢病毒载体介导EGFP/骨形态发生蛋白2(Lenti-EGFP/BMP-2)转染细胞,C组为未进行转染.转染24 h、48 h、72 h、1周、3周,检测EGFP基因表达;转染72 h后,免疫组织化学观察细胞骨形态发生蛋白2的表达;转染后72 h、1周、3周,Western blot检测骨形态发生蛋白2蛋白表达.结果与结论:①转染24 h后,A、B组可见EGFP表达,A组明显强于B组;转染48 h后,A、B组荧光进一步增强;转染72 h后,A组荧光强度近高峰,B组荧光持续增强.转染1周后,A组荧光强度开始下降,B组荧光强度仍然增强.转染3周后,A组荧光强度明显下降甚至消失,B组荧光强度有所下降,但仍然保持一定的表达.C组在各时间点均无EGFP表达;②A、B组胞浆均呈骨形态发生蛋白2阳性表达,C组呈阴性表达;③转染72 h后,A组骨形态发生蛋白2蛋白表达量强于B组;转染1周后,A组表达下降,B组表达增强并强于A组;转染3周后,A组表达微弱,B组持续表达且明显强于A组;④结果表明,相对腺病毒载体,慢病毒载体介导EGFP/骨形态发生蛋白2基因转染兔骨髓间充质干细胞在表达持续时间上具有一定的优势.
关键词：干细胞骨髓干细胞慢病毒载体腺病毒载体骨髓间充质干细胞基因转染骨形态发生蛋白类国家自然科学基金
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：国家自然科学基金资助项目(31160199)广西区自然科学基金资助项目(2014GXNSFAA118263)the National Natural Science Foundation of China, (No. 31160199)Natural Science Foundation of Guangxi Zhuang Autonomous Region, (No. 2014GXNSFAA118263)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1340-1345 )
英文信息