超声破碎及反复冻融收集脂肪间充质干细胞裂解液的最优条件
王俊怡1
金银鹏2
李洪超1
孟凌玉2
李莉2
王晓今2
周荣2
陈成伟2
傅青春2
程明亮3
1.贵州医科大学临床医学院,贵州省贵阳市,5500042.解放军第八五医院,上海肝病研究中心,上海市 2002353.贵州医科大学附属医院感染科,贵州省贵阳市,550004
摘要：背景:旁分泌在间充质干细胞治疗方面起主要作用.提取间充质干细胞裂解液,可以避免直接间充质干细胞本身所致栓塞、肿瘤以及免疫排斥反应等问题,然而目前提取间充质干细胞裂解液的方法存在差异.目的:比较超声破碎及反复冻融方法获得间充质干细胞裂解液的差异.方法:①从健康的人腹部皮下脂肪中分离出脂肪间充质干细胞,经贴壁筛选法纯化细胞,胎牛血清培养基体外培养扩增,并采用流式细胞检测仪鉴定其常用表面标记;②采用反复冻融及超声细胞破碎2种破壁方法,将1×109 L-1,2×109 L-1,4×109 L-13种不同密度的细胞分别置于生理盐水与双蒸水中进行破碎,比较细胞破碎率及裂解液蛋白含量的差异.结果与结论:①通过体外分离人体脂肪组织,可获得脂肪间充质干细胞;②细胞裂解时,细胞浓度越高,破壁所需时间越长,而破碎时间越长,则细胞破碎率越大;③生理盐水中超声细胞破碎法得到的蛋白含量较其他条件高;④结果提示在生理盐水环境下使用超声方法提取脂肪间充质干细胞裂解液尤为有效,且推荐细胞浓度为4×109 L-1以内.
关键词：干细胞脂肪干细胞间充质干细胞脂肪间充质干细胞超声反复冻融细胞裂解液细胞治疗细胞外膜泡
分类号：R394.2(医学遗传学)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 2631-2637 )
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