干细胞诱导、细胞系诱导和原代分离3种提取成骨细胞的方法比较
邓享誉
陈胜
邵增务
郑东
1.华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科,湖北省武汉市,4300002.华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科,湖北省武汉市,4300003.华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科,湖北省武汉市,4300004.华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科,湖北省武汉市,430000
摘要：背景:成骨细胞是骨组织构建的重要组织细胞之一.成骨细胞取材困难,不同方法获得的成骨细胞纯度及钙化能力不尽相同.目的:比较小鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导、细胞系MC3T3-E1成骨诱导和小鼠颅骨原代细胞培养3种方法获得的成骨细胞的纯度及钙化能力.方法:采用贴壁纯化法分离出小鼠骨髓间充质干细胞,传至3代后用成骨诱导培养基诱导21 d;将前成骨细胞系MC3T3分别用成骨诱导培养液1和成骨诱导培养液2诱导21 d;使用Ⅰ型胶原酶消化法取得乳鼠颅骨原代成骨细胞.对3种方法获得的成骨细胞进行茜素红钙结节染色,观察其成骨特性.结果与结论:①骨髓间充质干细胞诱导后钙结节平均为16.3个/低倍镜视野;②前成骨细胞系MC3T3诱导培养液1组可观察到稀疏的钙结节,平均为1.7个/低倍镜视野,诱导培养液2组可观察到密集的钙结节,平均为44.6个/低倍镜视野,两种诱导液相比钙结节形成能力差异有显著性意义(P<0.01);③原代成骨细胞钙结节平均为0.6个/低倍镜视野;④除MC3T3诱导液1组与原代成骨细胞相比差异无显著性意义外,其余两两相比成骨能力差异均有显著性意义(P<0.01);⑤由于骨髓间充质干细胞分离培养具有更多不可控因素,因此MC3T3细胞用含有地塞米松的诱导培养液2进行成骨诱导方法较好.
关键词：干细胞分化骨髓间充质干细胞MC3T3成骨细胞成骨诱导钙结节染色吉姆萨染色国家自然科学基金
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：国家自然科学基金资助(81472134)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 2729-2734 )
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