腺病毒载体携带标记基因EGFP转染人羊膜上皮细胞
金玲1
刘小勇2
徐玮2
郝晓宁1
牛静宜1
王乙婷1
曹端荣1
1.深圳市宝安人民医院眼科,广东省深圳市,5181012.暨南大学附属第一医院眼科,广东省广州市,510630
摘要：背景:人羊膜上皮细胞具有干细胞的某些性能,可诱导分化为角膜样上皮细胞,但在体外培养时无法示踪,不能有效地监测其细胞转归.目的:探讨利用腺病毒载体将标记基因EGFP转染入人羊膜上皮细胞的可行性及感染效率.方法:pDC316-mCMV-EGFP腺病毒包装后,腺病毒载体携带标记基因EGFP转染体外培养的人羊膜上皮细胞,并扩增培养,观察转染后人羊膜上皮细胞与未转染人羊膜上皮细胞的形态差异,并在荧光显微镜下观察转染基因的表达,用流式细胞仪检测转染细胞的细胞周期及EGFP阳性表达率.结果与结论:①多数转染细胞筛选出的抗性克隆以及培养的克隆细胞与正常体外培养的人羊膜上皮细胞在形态上无显著差异;②瞬时转染后48 h的人羊膜上皮细胞中增强型绿色荧光蛋白阳性表达率最高达99.01%;③转染后的人羊膜上皮细胞的细胞周期有所减慢,说明利用腺病毒载体能将标记基因EGFP转染入人羊膜上皮细胞,可更直观地观察到人羊膜上皮细胞在体外的进一步转归.
关键词：干细胞培养腺病毒绿色荧光蛋白人羊膜上皮细胞原代培养扩增培养基因转染转染效率细胞周期国家自然科学基金
分类号：R394.2(医学遗传学)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 3382-3387 )
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