乳鼠心肌细胞可成片生长的分离和培养方法
黄绍代1
陈鹏2
吴超3
胡丹3
彭江4
田建伟5
1.安徽医科大学,安徽省合肥市 230032;解放军空军总医院,北京市 100142;解放军总医院全军骨科研究所,北京市 1008532.中国医科大学第一附属医院,辽宁省沈阳市,1100013.解放军空军总医院,北京市,1001424.解放军总医院全军骨科研究所,北京市,1008535.安徽医科大学,安徽省合肥市 230032;解放军空军总医院,北京市 100142
摘要：背景:传统方法培养的心肌细胞活力、纯度仍不高,细胞多呈簇状生长,细胞与细胞之间的联系较少,细胞多呈单个搏动.目的:改进传统的乳鼠心肌细胞培养方法,获得纯度高、成片生长的心肌细胞.方法:运用0.1%胰蛋白酶4℃过夜消化心肌组织后加入Ⅱ型胶原酶重复消化,二次差速贴壁分离法联合化学抑制剂纯化心肌细胞.倒置相差显微镜下动态观察心肌细胞形态变化,培养48 h后用抗心肌肌钙蛋白T抗体鉴定心肌细胞纯度,连续10 d隔日记录心肌细胞的搏动频率.结果与结论:①心肌细胞在24 h内贴壁,72 h后成簇状分布,5-7 d细胞连接成片生长;②细胞存活率为96%,免疫荧光鉴定心肌细胞纯度97%以上,连续10 d内心肌细胞搏动频率差异无显著性意义(P>0.05);③综上,通过这种改进的培养方式获得成片生长的心肌细胞纯度、活力更高,是一种更为有效的乳鼠心肌细胞培养方法.
关键词：组织构建组织工程乳鼠心肌细胞原代培养成片生长国家自然科学基金
分类号：R318(医用一般科学)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 3875-3880 )
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