LncRNA-Braveheart促进骨髓间充质干细胞在体外向心肌样细胞分化
侯婧瑛
龙会宝
周长青
吴浩
郭天柱
钟婷婷
伍权华
汪蕾
郑韶欣
王彤
1.中山大学孙逸仙纪念医院急诊科,广东省广州市,5101202.中山大学孙逸仙纪念医院急诊科,广东省广州市,5101203.中山大学孙逸仙纪念医院急诊科,广东省广州市,5101204.中山大学孙逸仙纪念医院急诊科,广东省广州市,5101205.中山大学孙逸仙纪念医院急诊科,广东省广州市,5101206.中山大学孙逸仙纪念医院急诊科,广东省广州市,5101207.中山大学孙逸仙纪念医院急诊科,广东省广州市,5101208.中山大学孙逸仙纪念医院急诊科,广东省广州市,5101209.中山大学孙逸仙纪念医院急诊科,广东省广州市,51012010.中山大学孙逸仙纪念医院急诊科,广东省广州市,510120
摘要：背景:课题组前期研究发现骨髓间充质干细胞移植能够改善大鼠心肌梗死后心功能,但整体效果并不太理想,骨髓间充质干细胞在体内局部梗死微环境中的分化效率低下,其向心肌细胞分化的能力极其有限.目的:采用IncRNA-Bvht体外转染骨髓间充质干细胞,观察其对骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的影响.方法:构建含IncRNA-Bvht的病毒载体pLVX-IRES-ZsGreen1-lncRNA-Bvht,对骨髓间充质干细胞进行IncRNA-Bvht转染并检测转染效率.分离培养C57BL/6小鼠的骨髓间充质干细胞,并将第3代细胞分为3组:骨髓间充质干细胞组、空载体组和IncRNA-Bvht组.各组细胞培养48 h后用5-氮杂胞苷进行诱导分化24 h再进行正常培养2周,荧光显微镜观察骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化情况,免疫荧光染色、Western blot、qRT-PCR检测心肌分化标记物肌钙蛋白T和肌节蛋白的表达.结果与结论:①诱导分化后细胞形态发生改变,细胞之间形成连接,排列方向趋于一致;②免疫荧光检测结果显示IncRNA-Bvht组肌钙蛋白T和肌节蛋白表达呈现强阳性;肌钙蛋白T阳性细胞的比例显著增加;③qRT-PCR和Western blot检测结果显示IncRNA-Bvht组肌钙蛋白T和肌节蛋白的表达较空载体组和骨髓间充质干细胞组均明显升高(P＜0.01);④结果提示,IncRNA-Bvht转染能够有效促进骨髓间充质l细胞在体外向心肌样细胞发生分化.
关键词：干细胞骨髓间充质干细胞长链非编码RNA-Braveheart心肌样细胞心肌梗死国家自然科学基金
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：国家自然科学基金(81070125)国家自然科学基金(81270213)国家自然科学基金(81670306)广东省科技计划项目 (2014A020211002)广东省科技计划项目(2010B031600032)高校基本科研业务费中山大学青年教师重点培育项目(13ykzd16)广东省医学科研基金(A2016264)the National Natural Science Foundation of China,(No.81070125,81270213,81670306)the Science and Technology Plan Projects of Guangdong Province,(No.2014A020211002,2010B031600032)Fundamental Research Fund for Universities-Young Teacher Training Project of Sun Yat-Sen University,(No.13ykzd16)the Medical Research Fund of Guangdong Province,(No.A2016264)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 4593-4599 )
英文信息