过表达基质细胞衍生因子1基因促进骨髓间充质干细胞增殖和迁移
陈少强1
吴碧莲2
王姗姗1
黄海辉1
1.福建医科大学人体解剖与组织胚胎学系,福建省闽侯县,3501222.福建卫生职业技术学院人体解剖学教研室,福建省闽侯县,350101
摘要：背景:基质细胞衍生因子1(stromal cell derived factor,SDF-1)/CXCR4轴不仅能够促进骨髓间充质干细胞向损伤组织迁移,而且具有抑制骨髓间充质干细胞凋亡、增加骨髓间充质干细胞存活率及增殖活性等作用.目的:建立慢病毒介导的稳定过表达 SDF-1α 的骨髓间充质干细胞系,在体外观察其对骨髓间充质干细胞增殖和迁移的影响.方法:构建过表达SDF-1α重组慢病毒载体(pNL-SDF-1α-IRES2-EGFP),并以空载体质粒pNL-IRES2-EGFP、基因沉默质粒GV-118-SDF-1α-siRNA作为实验对照,分别转染293T细胞和骨髓间充质干细胞,建立稳定过表达SDF-1α的骨髓间充质干细胞系:SDF-1α-BMSCs组、null-BMSCs组和siRNA-BMSCs组;采用RT-PCR、Western Blot 方法检测 SDF-1α mRNA 和蛋白的表达水平;MTT 法检测骨髓间充质干细胞的增殖能力;Transwell迁移实验检测SDF-1α对骨髓间充质干细胞迁移能力的影响.结果与结论:①成功构建pNL-SDF-1α-IRES2-EGFP质粒,经测序结果表明pNL-SDF-1α-IRES2-EGFP重组质粒构建成功;② 慢病毒转染48 h 后可见293T 细胞和各组骨髓间充质干细胞强烈表达 EGFP;③SDF-1α-BMSCs组高效表达SDF-1α,siRNA-BMSCs组SDF-1α表达明显被抑制;④SDF-1α-BMSCs组的细胞增殖能力增强,SDF-1α可明显促进骨髓间充质干细胞的跨膜迁移.在抗SDF-1α多抗作用后各组细胞迁移指数明显下降;⑤结果可见,慢病毒载体可介导外源性基因 SDF-1α 在大鼠骨髓间充质干细胞中高效表达,并促进骨髓间充质干细胞的增殖和迁移.
关键词：干细胞细胞培养与分化慢病毒基质细胞衍生因子骨髓间充质干细胞过表达基因细胞增殖迁移福建省自然科学基金
分类号：R394.2(医学遗传学)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 32-39 )
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