非接触共培养条件下软骨细胞诱导骨膜细胞向软骨细胞分化
李威1
袁峰2
沃金1
张腾1
高鹏1
1.徐州医科大学,江苏省徐州市,2210002.徐州医科大学附属医院,江苏省徐州市,221000
摘要：背景:在非接触共培养条件下,软骨细胞可诱导骨髓间充质干细胞分化为软骨细胞.骨膜细胞作为软骨修复的种子细胞,其与软骨细胞共培养的作用及影响鲜有研究.目的:通过软骨细胞与骨膜细胞非接触共培养,利用软骨细胞诱导骨膜细胞向软骨细胞分化.方法:采用胰酶、Ⅱ型胶原酶消化法分离兔关节软骨细胞;组织块培养法分离兔骨膜细胞.分别取第2代软骨细胞和骨膜细胞,按1:1比例通过 transwell 培养板进行非接触共培养作为实验组,单纯骨膜细胞培养作为对照组.培养2周后,倒置显微镜观察2组细胞形态; Ⅱ型胶原免疫组化染色和甲苯胺蓝染色检测2组细胞的Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的合成;RT-PCR检测2组细胞的蛋白聚糖、Ⅱ型胶原α1和性别决定区Y框蛋白9 mRNA表达水平.结果与结论:①培养2周后,实验组共培养骨膜细胞逐渐变为类圆形软骨细胞形态,对照组骨膜细胞仍为长梭形;②实验组共培养骨膜细胞的Ⅱ型胶原免疫组化、甲苯胺蓝染色均为阳性,对照组为阴性;③RT-PCR结果显示,实验组共培养骨膜细胞的蛋白聚糖、Ⅱ型胶原α1、性别决定区Y框蛋白9 mRNA相对表达量明显高于对照组;④结果提示,非接触共培养条件下,软骨细胞可以诱导骨膜细胞向软骨细胞分化.
关键词：骨膜细胞软骨细胞非接触共培养诱导分化微环境基质组织构建Ⅱ型胶原蛋白聚糖
分类号：R318(医用一般科学)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 548-552 )
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