比较两种酶消化法对真皮成纤维细胞的影响
郭吉安
余丕军
王露萍
石莹莹
柳逸
陈炜
1.江苏大学附属上海市第八人民医院医学美容科,上海市,2002352.江苏大学附属上海市第八人民医院医学美容科,上海市,2002353.江苏大学附属上海市第八人民医院医学美容科,上海市,2002354.江苏大学附属上海市第八人民医院医学美容科,上海市,2002355.江苏大学附属上海市第八人民医院医学美容科,上海市,2002356.江苏大学附属上海市第八人民医院医学美容科,上海市,200235
摘要：背景:目前真皮成纤维细胞研究应用广泛、需求量大、分离方法多,但是用于细胞分离培养的酶消化法尚未有对比研究.目的:比较两种酶消化方法分离的真皮成纤维细胞的细胞产量、形态、迁移、增殖4个方面的差异.方法:分别使用中性蛋白酶+胶原酶或胰蛋白酶分离消化真皮成纤维细胞,并进行细胞计数,原代培养并观察细胞形态学差异,采用细胞划痕实验观察细胞迁移能力并使用CCK-8检测细胞增殖活力.结果与结论:①采用中性蛋白酶+胶原酶消化的成纤维细胞在接种后六七天后融合,通过胰蛋白酶消化分离的成纤维细胞在八九天后融合,两种酶消化法都可获得真皮成纤维细胞;②与胰蛋白酶消化组相比,中性蛋白酶+胶原酶消化组的细胞产量显著增加;③划痕实验结果显示,胰蛋白酶消化的真皮成纤维细胞迁移速度较中性蛋白酶+胶原酶消化的细胞显著减慢;④两种酶消化方法分离的真皮成纤维细胞生长曲线均显示细胞数与培养时间呈正相关关系,在第3,4和5天,中性蛋白酶+胶原酶组的成纤维细胞的吸光度均显着高于胰蛋白酶组细胞的吸光度;⑤结果表明,与胰蛋白酶消化相比,用中性蛋白酶+胶原酶消化的细胞产量、迁移、增殖能力均更高;提示中性蛋白酶+胶原酶消化法优于胰蛋白酶消化法.
关键词：真皮成纤维细胞细胞培养组织工程中性蛋白酶胶原酶胰蛋白酶消化组织构建培养
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：上海市卫生计划和生育委员会科研项目(20154Y0198)上海市徐汇区医学科研项目(SHXH201606)JLY20160077]the Shanghai Municipal Commission of Health and Family Planning, (No. 20154Y0198)Xuhui District Medical Research Project of Shanghai, (No. SHXH201606)the Clinical Medical Science and Technology Development Foundation of Jiangsu University, (No. JLY20160077)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1205-1210 )
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