生物活性材料Col-Tgel对人组织干细胞的作用
尹秀秀
胡林萍
朱才英
张孝兵
程涛
1.实验血液学国家重点实验室,中国医学科学院血液病医院血液学研究所,中国医学科学院干细胞医学中心,北京协和医学院干细胞与再生医学系,中国医学科学院暨北京协和医学院,天津市 3000202.实验血液学国家重点实验室,中国医学科学院血液病医院血液学研究所,中国医学科学院干细胞医学中心,北京协和医学院干细胞与再生医学系,中国医学科学院暨北京协和医学院,天津市 3000203.实验血液学国家重点实验室,中国医学科学院血液病医院血液学研究所,中国医学科学院干细胞医学中心,北京协和医学院干细胞与再生医学系,中国医学科学院暨北京协和医学院,天津市 3000204.实验血液学国家重点实验室,中国医学科学院血液病医院血液学研究所,中国医学科学院干细胞医学中心,北京协和医学院干细胞与再生医学系,中国医学科学院暨北京协和医学院,天津市 3000205.实验血液学国家重点实验室,中国医学科学院血液病医院血液学研究所,中国医学科学院干细胞医学中心,北京协和医学院干细胞与再生医学系,中国医学科学院暨北京协和医学院,天津市 300020
摘要：背景:虽然传统的人干细胞二维平面培养体系操作简便,但并不能真正模拟体内的三维生理微环境,不利于进行人干细胞生物学行为研究.目的:为构建一种可为细胞生长增殖提供类似于体内生理环境的三维培养体系,观察生物材料Col-Tgel对人造血干细胞和人间充质干细胞生物活性的影响.方法:①体外共培养实验:三维培养组,将绿色荧光蛋白标记的人间充质干细胞与人脐带 CD34+细胞直接接触共培养于生物材料Col-Tgel中;单独培养组,将人脐血CD34+细胞培养于生物材料Col-Tgel中;二维培养组,将绿色萤光蛋白标记的人间充质干细胞与人脐血CD34+细胞共培养于transwell小室;对照组,常规培养人脐血CD34+细胞.培养3 d后,流式细胞仪检测各组CD34+CD38-CD45RA-CD90+细胞比例,同时对直接接触培养组进行原位免疫荧光染色;②体内移植实验:采用X射线照射NOD/SCID小鼠,照射后24 h分2组治疗,实验组于胫骨骨髓腔移植绿色荧光蛋白标记的人间充质干细胞-生物材料Col-Tgel溶液,对照组移植绿色荧光蛋白标记的人间充质干细胞-PBS溶液,移植3 d后进行移植侧胫骨标本双光子/共聚焦显微镜检测.结果与结论:①体外实验:三维培养组 CD34+CD38-CD45RA-CD90+细胞扩增倍数为二维培养组的2.8倍,说明在生物材料Col-Tgel中培养的间充质干细胞促进了CD34+CD38-CD45RA-CD90+细胞的扩增;三维培养组CD34+CD38-CD45RA-CD90+细胞扩增倍数较单独培养组增加4.5倍,较对照组增加1.5倍;免疫荧光染色显示,人间充质干细胞与人脐血CD34+细胞可在生物材料Col-Tgel中存活;②体内实验显示,两组均可见存活的人间充质干细胞;③结果表明,生物材料Col-Tgel可为人干细胞生长及增殖提供类似于体内微环境的三维体系.
关键词：生物材料Col-Tgel干细胞造血干细胞间充质干细胞体外共培养原位免疫荧光染色增殖移植国家自然科学基金
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：国家重点研发计划项目(2016YFA0100600)中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目(2016-I2M-1-017)国家自然科学基金项目(81400150)国家自然科学基金项目(81570164)创新研究群体科学基金项目(81421002)中央高校基本科研业务费专项资金项目(3332016090)CAMS Initiative for Innovative Medicine,(No.2016-I2M-1-017)the National Natural Science Foundation of China,(No.81400150,81570164)the Science Foundation for Innovation Research Groups,(No.81421002)the Youth Foundation of PUMC and the Fundamental Research Funds for the Central Universities,(No.3332016090)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1540-1546 )
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