电穿孔法转染脐带华通胶间充质干细胞的最佳条件
王泽1
李春花2
张宁坤2
高连如2
陈宇1
1.安徽医科大学海军临床学院,北京市 100048;解放军海军总医院心血管内科,北京市 1000482.解放军海军总医院心血管内科,北京市,100048
摘要：背景:脐带华通胶间充质干细胞是目前较为原始的干细胞,为当前干细胞的研究热点之一,是基因治疗的理想载体.然而,目前尚未有对脐带华通胶间充质干细胞电转染条件的研究,因此探索脐带华通胶间充质干细胞的电转染最佳条件占据重要地位.目的:探讨不同电穿孔条件对脐带华通胶间充质干细胞转染率的影响,以确定最佳电转染条件.方法:通过控制电压、脉冲时长及细胞状态等转染条件,采用不同条件组合后用电穿孔法将质粒EEV-EGFP转入脐带华通胶间充质干细胞,流式细胞仪检测转染率.结果与结论:①电压自125 V至150 V,转染率呈现递增趋势,150 V时获得最大转染率,但将电压进一步调高至170 V,转染率开始显著降低;②脉冲时长为5.0 ms时获得最大转染率;脉冲时长为2.5 ms和7.5 ms时转染效率均有所降低;③与低氧培养比较,正常培养的细胞转染率更高;④结果表明,正常培养的脐带华通胶间充质干细胞在电压150 V、脉冲时长5.0 ms、脉冲间隔时间50 ms、脉冲数2次时可达到较高的电转染率.
关键词：电穿孔电转染华通胶间充质干细胞华通胶低氧培养干细胞国家自然科学基金
分类号：R394.2(医学遗传学)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 2717-2721 )
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