脂多糖干预ob/ob小鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化
刘大勇1
周伟伟2
肖蕊1
王梅蕊1
赵梦明1
贾智1
1.天津医科大学口腔医院牙体牙髓科,天津市,3000702.天津医科大学口腔医院牙体牙髓科,天津市300070;首都医科大学附属北京口腔医院急诊综合诊疗中心,北京市100069
摘要：背景:肥胖是牙周炎及机体其他疾病的易感因素,因肥胖与瘦素密切相关,目前尚无通过瘦素基因突变小鼠骨髓间充质干细胞的分化情况探索相关机制的研究.目的:通过研究ob/ob遗传性肥胖小鼠骨髓间充质干细胞在脂多糖刺激下的成骨能力及成骨相关分子的表达,从分子及细胞水平探讨肥胖与成骨能力的相关机制.方法:选用8周龄雄性肥胖ob/ob小鼠、8周龄雄性C57小鼠(由中国医学科学院实验动物研究所提供)各8只,取两组小鼠双侧股骨,采用全骨髓法分离培养纯化得到ob/ob小鼠骨髓间充质干细胞及C57小鼠骨髓间充质干细胞,加入含有100 μg/L脂多糖的成骨诱导液进行成骨诱导分化,通过碱性磷酸酶染色、茜素红染色和碱性磷酸酶活性检测观察比较两组小鼠骨髓间充质干细胞成骨能力.采用RT-PCR检测两组小鼠骨髓间充质干细胞中Alp、Runx2、Ocn、Nf-Kb mRNA表达水平.结果与结论:①成骨诱导1周后,与C57小鼠骨髓间充质干细胞比较,ob/ob小鼠骨髓间充质干细胞碱性磷酸酶染色减弱,碱性磷酸酶活性显著降低(P＜0.01);成骨诱导液中添加脂多糖后,碱性磷酸酶活性较未添加脂多糖组显著下降(P＜ 0.01),ob/ob小鼠骨髓间充质干细胞碱性磷酸酶活性亦较C57小鼠骨髓间充质干细胞显著降低(P＜0.05);②成骨诱导2周后,与C57小鼠骨髓间充质干细胞比较,ob/ob小鼠骨髓间充质干细胞茜素红染成橘红色的矿化结节减少,而成骨诱导液中添加脂多糖后,两组骨髓间充质干细胞均未见矿化结节形成;③成骨诱导后,与C57小鼠骨髓间充质干细胞比较,ob/ob小鼠骨髓间充质干细胞中Alp、Runx2、Ocn mRNA表达降低(P＜ 0.05);诱导液中加入脂多糖后,Alp、Runx2、Ocn表达较未添加脂多糖组均显著减少(P＜0.05),且在ob/ob小鼠骨髓间充质干细胞中Ocn、Runx2表达较C57小鼠骨髓间充质干细胞明显降低(P＜0.05);④结果表明,瘦素缺乏的肥胖小鼠骨髓间充质干细胞成骨向分化发生障碍.在低浓度脂多糖刺激下,ob/ob小鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化能力较C57小鼠骨髓间充质干细胞下降更明显.
关键词：骨髓间充质干细胞脂多糖肥胖ob/ob小鼠C5小鼠成骨分化国家自然科学基金
分类号：R459.9(治疗学)R394.2(医学遗传学)
资助基金：国家自然科学基金(81670953)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 703-709 )
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