脂联素基因修饰脂肪干细胞移植治疗大鼠肾病综合征
田萌1
韩鸿玲2
1.天津医科大学总医院,天津市300000;天津市津南区咸水沽医院,天津市 3003502.天津医科大学总医院,天津市,300000
摘要：背景:脂联素基因表达在肾病综合征的发病过程中有着重要的作用,移植脂肪干细胞可以对肾病综合征大鼠起到一定的治疗效果.目的:探讨脂联素基因转染脂肪干细胞移植对肾病综合征大鼠肾功能及凝血功能的改善作用.方法:①在体外复苏培养脂肪干细胞并制备其细胞悬液,采用CM-Dil进行标记,取第3代脂肪干细胞进行脂联素基因电转染,Westem blot检测转染第3天和第28天细胞中脂联素蛋白的相对表达水平;②从80只SD大鼠(北京维通利华动物实验技术有限公司提供)中随机取20只不予任何处理作为正常对照组,其余60只SD大鼠静脉内注射阿霉素建立肾病综合征大鼠模型,随机分为3组:模型组、脂肪干细胞组以及脂联素修饰脂肪干细胞组,正常对照组和模型组大鼠经尾静脉注射20 μL PBS,脂肪干细胞组、脂联素修饰脂肪干细胞组大鼠经尾静脉注射20 μL转染空载质粒的脂肪干细胞悬液或脂联素修饰的脂肪干细胞悬液,1次/d,连续7d;③移植4周后,全自动生化分析仪检测血清生化指标和凝血指标,苏木精-伊红染色观察肾组织病理变化,RT-PCR、Western blot检测肾组织中乙酰肝素酶及脂联素的表达.结果与结论:①Western blot检测显示脂肪干细胞中脂联素高表达可持续28 d;②脂联素修饰脂肪干细胞组的病理改善明显优于脂肪干细胞组,脂肪干细胞组较模型组稍有改善;③脂肪干细胞组及脂联素修饰脂肪干细胞组的24 h尿蛋白定量及血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白、肌酐、尿素氮水平均明显低于模型组(P＜0.05),而血清总蛋白、白蛋白、高密度脂蛋白水平则明显高于模型组(P＜0.05).脂联素修饰脂肪干细胞组各项生理生化指标均优于脂肪干细胞组,差异有显著性意义(P＜0.05).脂肪干细胞组、脂联素修饰脂肪干细胞组大鼠的血液高凝状态较模型组明显缓解,脂联素修饰脂肪干细胞组缓解更明显,各组间差异有显著性意义(P＜0.05);④与模型组相比,脂肪干细胞组、脂联素修饰脂肪干细胞组大鼠肾组织中乙酰肝素酶的mRNA和蛋白表达水平明显降低(P＜0.05),而脂联素表达水平明显升高(P＜0.05).脂联素修饰脂肪干细胞组乙酰肝素酶和脂联素mRNA和蛋白表达水平均优于脂肪干细胞组(P＜0.05);⑤结果表明,脂联素基因修饰的脂肪干细胞移植可以显著改善肾病综合征大鼠的肾功能、血液高凝状态及高脂血症,该作用可能与乙酰肝素酶和脂联素的表达水平有关.
关键词：肾病综合征脂联素基因修饰脂肪干细胞细胞移植肾功能凝血乙酰肝素酶
分类号：R459.9(治疗学)R394.2(医学遗传学)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 723-728 )
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