去卵巢大鼠血清来源外泌体促进原代成骨细胞的增殖
高坤1
朱文秀2
李亨1
刘伟东1
李全1
余伟吉1
王立新1
曹亚飞1
1.深圳市中医院,广东省深圳市,5180002.北京中医药大学深圳医院,广东省深圳市,518000
摘要：背景:骨代谢过程中,成骨细胞的数量和功能的变化影响骨的生物学特性,外泌体能够通过细胞间的传递进行信号传递,具有促进细胞增殖、分化的潜能.目的:探讨骨质疏松大鼠血清中外泌体的性质及其对成骨细胞的作用.方法:32只成年健康雌性SD大鼠,24 h新生SD大鼠若干只用于原代成骨细胞分离培养,实验动物由广东省医学动物实验中心提供.①建立去卵巢骨质疏松大鼠模型,以假手术组大鼠为对照组.通过ExoQuick提取对照组和骨质疏松大鼠血清中外泌体,用电镜、nanosight、Western blotting进行鉴定;②取对数期的原代成骨细胞接种于96孔细胞培养板中,接种浓度为2×104/孔.实验分为空白对照、外泌体对照组、骨质疏松外泌体组,分别加入DPBS、正常血清外泌体和骨质疏松血清外泌体,100μL/孔,CO2培养箱培育1 d,采用四甲基偶氮唑盐比色法检测成骨细胞的增殖;酶联免疫吸附试验法检测外泌体中血管内皮生长因子的浓度.结果与结论:①成功提取大小在100 nm以下外泌体颗粒;②蛋白定量检测12周组外泌体蛋白质量浓度最高;不同时间点外泌体颗粒数12周组略高,但未见明显差异;③骨质疏松大鼠血清来源外泌体与空白对照组及正常外泌体组相比较,明显促进成骨细胞的增殖,且外泌体内血管内皮生长因子升高;④结果说明,骨质疏松大鼠血清中外泌体能够促进成骨细胞的增殖.
关键词：骨质疏松外泌体成骨细胞血管内皮生长因子组织构建
分类号：R446(诊断学)R318(医用一般科学)
资助基金：国家自然科学基金(20171244)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 985-989 )
英文信息