贴壁培养法鉴定海马神经干/祖细胞的增殖与分化能力
胡玉婷
刘菲
刘静
陶欣荣
1.安徽理工大学医学院,安徽省淮南市,2320012.安徽理工大学医学院,安徽省淮南市,2320013.安徽理工大学医学院,安徽省淮南市,2320014.安徽理工大学医学院,安徽省淮南市,232001
摘要：背景:神经干/祖细胞广泛应用于神经发育、神经相关性疾病和细胞移植等研究,体外分离培养的神经干/祖细胞能够为相关研究提供细胞模型.目的:探讨分离新生小鼠海马组织并高效培养出神经干/祖细胞的方法,并使用贴壁培养法对其增殖以及分化能力进行鉴定.方法:分离新生C57BL/6 小鼠海马组织,培养原代神经干/祖细胞并扩增,进行形态学观察;联合使用多聚赖氨酸和层粘连蛋白促进细胞贴附,进行贴壁培养;免疫荧光法检测特异性标志蛋白Nestin 表达和增殖指标Ki-67的表达;使用神经干/祖细胞分化培养基诱导分化培养7 d 后,免疫荧光法检测GFAP、DCX、Tuj1 和S100β的表达.结果与结论:①培养的神经干/祖细胞约82％表达Nestin,约49％表达Ki-67;②诱导分化后,少数细胞为DCX阳性,大多数细胞为GFAP 阳性.荧光双色染色后显示Tuj1 和S100β 表达的神经元和星形胶质细胞比例为1∶1.7;③结果显示,从新生C57BL/6 小鼠海马组织中成功分离并高效培养出神经干/祖细胞,贴壁培养后有效地对其增殖和分化能力进行了鉴定,能够为进一步实验研究提供足够的细胞来源.
关键词：神经干/祖细胞海马悬浮培养法贴壁培养法干细胞国家自然科学基金
分类号：R459.9(治疗学)R394.2(医学遗传学)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1330-1335 )
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