RNA干扰Id2基因表达抑制PC-3前列腺肿瘤干细胞的增殖及侵袭能力
张莹莹
王英磊
孟琳
肖琳
李忠海
赵战魁
吴厚苛
1.济宁医学院附属医院儿科,山东省济宁市,2720002.济宁医学院附属医院泌尿外科,山东省济宁市,272000
摘要：背景:Id基因是碱性螺旋-环-螺旋因子的内源性负性调节因子.该因子参与细胞的增殖、分化和生存, 并在不同类型肿瘤的进展和浸润过程中表现出功能的多样性.目的:探讨沉默Id2基因表达对人前列腺肿瘤干细胞增殖和侵袭能力的影响.方法:取对数生长期的PC-3人前列腺癌细胞, 采用无血清悬浮培养法分离肿瘤干细胞球, 流式细胞仪检测肿瘤干细胞表面标记CD44+CD24-表达.构建sh RNA-Id2表达载体, 转染至前列腺肿瘤干细胞, 以未转染的前列腺肿瘤干细胞为对照.转染后48 h, 采用RT-PCR与Western blot实验检测前列腺肿瘤干细胞Id2基因及蛋白的表达;采用MTT法、Transwell小室检测前列腺肿瘤干细胞的增殖和侵袭能力;采用Western blot与RT-PCR检测前列腺肿瘤干细胞上皮标志物E-钙黏蛋白、间质细胞标志物波形蛋白及上皮细胞-间充质转化调控转录因子Twist的表达.结果与结论: (1) 采用无血清悬浮培养法成功分离出肿瘤干细胞球, 第3代前列腺肿瘤干细胞表面标记CD44+CD24-表达率为 (85.69±8.96) ％, 显示培养的肿瘤干细胞球高表达肿瘤干细胞表型; (2) 转染后48h, sh RNA-Id2转染组细胞Id2基因及蛋白表达明显低于未转染组 (P <0.05) , 显示成功干扰了前列腺肿瘤干细胞Id2表达; (3) shRNA-Id2转染组前列腺肿瘤干细胞的增殖速度和侵袭能力低于未转染组 (P<0.05) ; (4) sh RNA-Id2转染组前列腺肿瘤干细胞的上皮标志物E-钙黏蛋白表达高于未转染组 (P<0.05) , 间质细胞标志物波形蛋白、上皮细胞-间充质转化调控转录因子Twist表达低于未转染组 (P <0.05) ; (5) 结果表明, RNA干扰Id2基因表达可通过调控E-钙黏蛋白、波形蛋白及Twist表达抑制前列腺肿瘤干细胞的增殖及侵袭能力.
关键词：前列腺肿瘤肿瘤干细胞前列腺肿瘤干细胞Id2基因RNA干扰细胞增殖细胞侵袭
分类号：R459.9(治疗学)R394.2(医学遗传学)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1342-1348 )
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